단백질의 정량분석 ­ Kjeldahl 질소 정량법 예비A+

목차

1. Theme
2. Purpose
3. Principle
4. Reagent & Equipment
5. Method

본문내용

4. Purpose
Kjeldahl 질소 정량법을 이용하여 분해, 증류, 중화, 적정 4가지 반응을 이용하여 조단백의 정량을 할 수 있다.

5. Principle
[1] 단백질 분석
① 단백질
- 아미노산이 펩티드 결합에 의해 상호 결합한 고분자 질소화합물.
- 식품을 구성하는 각 성분 중에서 질소를 함유하고 있는 것.
- 탄수화물이나 지질과 달리 평균 16% 질소를 함유함.
- 질소는 단백질에서 특유의 성분임.
- 식품의 단백질은 종류에 따라 질소 조성이 다름.

② 조단백질
- 식품 중에 단백질 외에 여러 가지 비단백태 질소 화합물이 함유되어 있는 것.
- 비단백태 질소 : 식품 중에 질소 화합물 아미노산, amide화합물, 암모니아 화합물, purine 염기, creatin과 같이 단백질이 아닌 것.
- 질소를 함유하고 있다하여 반드시 단백질이라고는 할 수 없음.

<중 략>

7. Method
<시약조제>
① 분해촉매제 : K2SO4 9g과 CuSO4‧5H2O 1g을 유발로 분쇄, 혼합하여 사용했다.
② 0.1N H2SO4, NaOH용액 : 정확히 표정된 것을 사용했다.
③ 중화용 NaOH 용액 : 아질산을 함유하지 않은 NaOH 450g을 증류수 1L에 녹여 냉각 후 폴리에틸렌 병에 넣어 약 하룻밤 정도 정치시켜 탄산염(Na2CO3)을 침전 시키고, 상징액만을 사용했다.
④ 혼합지시약 : 0.1% 메틸레드‧알코올용액과 0.1% 메틸렌블루‧알코올 용액의 등량 혼합했다.

<본실험>
① 킬달 플라스크에 1~2g의 시료(무게기록)를 유산지에 싸서 넣었다.
② 분해 – 킬달 플라스크에 분해촉매제와 비등석을 1스푼 넣었다.
- 진한황산 20mL을 넣었다.
- 가열(분해) (4시간) → 냉각(30분 ~ 1시간) → 적당량의 증류수로 희석(10배희석)했다. (분해희석액)

참고 자료

없음