해부학실험 생쥐, 메추라기, 붕어의 해부학적 기본 구조 관찰 및 조직 고정

목차

1. Title
2. Date
3. Purpose
4. Principle
5. Results
6. Discussion
7. References

본문내용

1. 정의
* 탈수-투명-침투-포매-삭정-박절
* 현미경 관찰을 위해 빛이 투과할 수 있도록 얇은 절편(박절두께-5μ)을 만들기 위해 특수한 매질(포매제)을 조직 속에 침투시켜 조직의 구조를 유지하면서 고형화시고 얇게 박절하는 과정

2. 탈수(조직으로부터 수분제거)
탈수제는 조직 내로 침투되고, 상대적으로 물은 조직 밖으로 나오는 치환 과정

1) 탈수 전 처리
* 고정에 사용된 조직내의 고정제를 제거하기 위해 물 또는 70%~100% 알콜로 씻어낸다.
- Formalin액, Orth액, Zenker액, Champy액 : 물에 12시간 수세
- Bouin액 : 70~80%알콜에 세척
- Susa액 : 90~95%알콜
- Carnoy액 : 100%알콜

* 지방이 다량 함유된 조직은 지방을 제거해야한다. 그렇지 않으면 탈수, 투명, 포매제의 침투가 되지 않아 표본을 제작 할 수 없다.

A. alcohol 법: 조직부피 20배의 95%알콜에 조직을 담그고 매일 알콜을 교환 5~6일간 시행
이 방법은 조직의 손상을 최소화함
B. 비알콜법: Ether, chloroform, acetone 등을 단독으로 혹은 2가지 이상 혼합하여 높은 온도에서 빠 른 시간에 지방을 제거할 수 있다. 이 방법은 조직의 손상이 심하다.

* 승홍이 함유된 조직은 수세후 Iodine, Hypo액을 차례로 처리하여 승홍제거
* 뼈는 중화제 제거를 위해 알콜이나 물로 수세
* 작은 조직은 유실되지 않도록 주의

2) 탈수제

3) 탈수과정
* 저농도의 알콜-고농도의 알콜(조직의 상태를 최소화로 변화시키기 위함)
* 1시간씩 처리
* 완전탈수 : 조직 내 3~4%의 수분의 남은 상태

3. 투명
* alcohol 제거, 즉 알콜대신 투명제가 들어가 침투제인 paraffin과 잘 혼합될 수 있도록 치환시키는 것 (알콜이 투명제와 치환되면 조직의 굴절률 1.54와 같아지므로 조직이 투명하게 됨)

참고 자료

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