그람양성,음성세균 실험보고서

소개글

E.coli 와 S.aureus를 대상으로한 염색실험 보고서

목차

▶ 실험의 제목
▶ 실험의 목적
▶ 실험 원리
▶ 실험 재료 및 방법

본문내용

▶ 실험의 제목
그람 염색 (Gram staining)

▶ 실험의 목적
미생물 분류의 한 방법으로 그람 염색을 실시해 본다.

▶ 실험 원리
미생물 균체는 크기가 미세하고, 액체배지에 현탁되어 있으면 투명하거나 색깔이 없이 때문에 살아 있는 상태로 관찰하기는 대단히 어렵다. 따라서 이들의 형태와 특징을 관찰하기 위해서는 염색하여 현미경으로 관찰하여야 한다. 이때 사용되는 염색시약은 벤젠고리를 함유한 유기화합물과 발색단인 Chromophor가 결합되어 형성된 Chromogen에 이를 이온화시켜 착색기능을 부여하는 Auxochrome group을 결합시킨 물질로 구성되어 있다. 즉 이 염색시약이 이온화되면 그 특성에 따라 chromogen 부분이 음이온을 띠거나 양이온을 띠게 되면 전자를 산성 염색시약(Acidic dyes), 후자를 염기성 염색시약(Basic dyes)이라 한다.
염색은 세포 성분 중 단백질이나 핵산 같은 거대분자와 Chromogen의 정전기적 성질에 따라 결합하여 세포성분에 착색된다. 먼저 산성 염색시약은 염색시약이 이온화되면 Chromogen 부분이 음이온을 띠게 되고, 이것이 세포의 양이온 성분과 강하게 결합하여 염색된다. 이러한 산성 염색시약에는 Picric acid, Eosin, Nigrosin 등이 있다. 염기성 염색시약은 염색시약이 이온화되면 Chromogen 부분이 양이온을 띠게 되고 이것이 세포의 음이온 성분과 강하게 결합하여 염색된다.
이러한 염색시약을 이용한 염색은 세포의 형태학적 특성과 세포 구조를 관찰하는데 도움을 준다. 이러한 목적을 위해 한 가지 염색시약을 사용하여 염색하는 단순염색(Simple staining)과 두 가지 염색약을 사용하는 분별염색(Differential staining)으로 나눈다. 분별염색에는 그람염색, 항산성염색, 그리고 포자, 편모, 협막염색 등이 속한다.

1) 미생물 염색 원리

세균의 염색은 일반적으로 세포의 모세관현상, 삼투압, 세포에의 부착과 흡수에 의한 물리적 기전, 세포구성물과 염료 사이의 전기적 전하와 화학적 친화력에 의해 염색된다.

참고 자료

• Cappuccino, 2005, Microbiology, 7th, PEARSON, San Francisco, P 53～87
• 김영권 외, 2001, 미생물학실험, 2nd, 고려의학, 서울, P 23, 57～92
• 한국미생물학회, 1998, 미생물학실험서, 1st, 을유문화사, 서울, P 11～48
• 권오용 외 4인, 1994, 생물학 실험서, 학문사, p.283~290
• Tortora & Funke & Case, Microbiology - an introduction 8th edition(2003), Pearson Benjamin Cummings, pp 83~85
• http://blog.daum.net/threeleaf_clover , 2010. 7. 26일 접속