[생명공학실험]Ligation 예비레포트

소개글

생명공학실험의 Ligation 예비레포트 입니다.
그림, 참고사항과 함께 잘 정리되어 있습니다~

목차

1. Title
2. Date
3. Objective
4. Theory

본문내용

1. Title Ligation
2. Date 2008. 10. 01
3. Objective
- 저번 실험에서 증폭된 PCR product를 T-vector에 삽입하여 Ligation하고, ligation에 관련된 화학 반응과 그 원리를 이해한다.
(두 인접한 nucleotide(뉴클레오티드)의 3′ hydroxyl과 5′ phosphate간에 phosphodiester결합을 촉진시키는 기능을 하는 ligase를 이용하여 DNA상의 nick을 공유 결합적으로 연결한다.)
4. Theory
<DNA의 ligation>
- Ligation은 문자 그대로 DNA나 RNA의 끝을 이어주는 과정을 가리키는 용어로 DNA ligase를 이용하여 phosphodiester bond를 형성시켜 관심있는 PCR product를 T-vector내에 연결시켜 주는 것을 말한다.(가위와 풀을 이용해서 종이를 잘라 붙이는 것과 같이 가위에 해당하는 것이 restriction enzyme이고, 풀에 해당하는 것이 DNA ligase이다.) ligase는 이 반응에 이용되는 효소로 DNA를 기질로 사용하는 ligase를 DNA ligase, RNA를 기질로 사용하는 ligase를 RNA ligase라 한다. RNA ligase는 single strand의 DNA 또는 RNA 끼리 연결해 주는 효소로 5`-RACE와 같은 특수한 목적의 실험에서 사용될 수 있다.

참고 자료

http://www.genehunters.co.kr(Ligation)
http://www.genehunters.co.kr (Ditermination of vector)
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_workshop/DNA_ligation.php
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_molecular/gene_cloning_15.php
http://www.babel5.org/babel5/courseMatrix.action?cid=4(Ligation)