[인천대 생명공학실험2 A+] Plasmid extraction(플라스미드 추출) 실험결과 보고서

소개글

A+를 쉽게 받을 수 있도록 매우 정리가 잘 되어 있는 agar배지 및 Competent cell 제작 실험결과 보고서 입니다.
LB(w/km) 배지, DNA extraction protocol, plasmid(플라스미드) 추출 방법, Harvesting, Resuspension, Lysis, Neutralization, DNA binding, Wash/Dry, DNA elution, Nanodrop 등에 대한 이론을 포함하고 있습니다.
이론 외에 실험결과와 오차의 원인까지 포함한 고찰 및 결론 또한 체계적으로 꼼꼼히 적혀있습니다.

목차

1. Abstract
2. Information
3. Materials and Methods
4. Result
5. Discussion
6. Conclusion
7. Reference

본문내용

Abstract
LB w/km배지에서 키운 kanamycin 저항성 유전자를 갖는 형질전환된 E.coli를 DNA extracion 7단계를 이용해 추출하며 각 단계는 Harvesting, Resuspension (PD1buffer-RNase),Lysis (PD2 buffer), Neutalization(PD buffer 3),DNA binding(column), Wash/Dry(wash buffer-EtOH포함), Elusion(DW or TE buffer)으로 구성되어 있으며 추출한 DNA를 이용해 Nanodrop으로 DNA를 정량한다. 이때 A260,A280에서 흡광도를 측정해 A260/A280의 흡광도 값이 1.8-2.0일 경우 높은 순도의 DNA가 측정되었다고 판단하는데 2B-1튜브와 2B-2튜브에서 각각 plasmid DNA의 농도 81.78, 89.24ng/㎕, 순도1.10, 1.15의 결과값을 얻었다. PEGFP-N1/SPD1 cell colony를 접종한 LB broth(w/km)의 색이 접종 직후 옅은 아이보리색에서 일주일 후 짙은 아이보리 색으로 변했으며 첫번째 샘플에서는 부유물이 없이 맑았으나 두번째 샘플에서는 하얀 부유물이 떠다녀 두번째 샘플이 다른 미생물에 의해 오염이 되었다고 판단했다.

참고 자료

Michael T. et al., Brock의 미생물학 11th, PEARSON 402-403
Reece et al., Campbell Biology Concept&Connection, 2011, PEARSON, p 21, 27,29, 442,443
Joanne M. Willey et al., Prescott’s Microbiology 9th, 2016,라이프사이언스, p 111-113, 192, 357