외래 유전자의 호율적인 발현 조절을 위한 개선된 Tetracycline-Inducible Expression System의 구축
* 본 문서는 배포용으로 복사 및 편집이 불가합니다.
서지정보
ㆍ발행기관 : 한국동물번식학회
ㆍ수록지정보 : Reproductive & developmental biology / 33권 / 1호
ㆍ저자명 : 구본철, 권모선, 김태완
ㆍ저자명 : 구본철, 권모선, 김태완
목차
ABSTRACT 서론 실험방법 Tet System의 개선 Tet System에 의한 EGFP 유전자 발현 조절 양상의 분자생물학적 분석 형광현미경을 이용한 EGFP 발현 관찰 RT-PCR Fluorometry와 Western Blotting 결과 형광현미경 하에서의 각 Vector에 따른 EGFP 발현 조절 양상 관찰 각 세포주에서 EGFP 발현 조절 양상에 대한 RT-PCR 분석 각 세포주에서 EGFP 발현에 대한 단백질 수준의 정량 분석 고찰 인용문헌영어 초록
In this study we tried to construct a more efficient tetracycline-inducible gene expression system by replacing previous key elements with more advance ones. At the beginning, we substituted PGK (phophoglycerate kinase) promoter for CMV (cytomegalovirus) promoter to control “rtTA2sM2” which has been known for high induction efficiency in response to tetracycline. With this modification, expression of the EGFP marker gene under the induction condition was significantly increased. Next, we replaced “TRE” fragment with a modified version named “TRE- tight” which has been reported to have higher affinity and specificity to the transactivator by minor base change of the “TRE” DNA fragment sequence. Use of “TRE-tight” instead of “TRE” resulted in more than 10 fold increment in terms of induction efficiency and significant decrement of background expression in non-inducible condition. By combining PGK promoter and “TRE-tight” fragment, we could upgrade previous tetracycline-inducible system to show more stringent turn on/off gene switch ability and stronger expression of the gene of our interest. Use of this newly developed system must be very helpful to the studies of gene expression, especially to the transgenic animal study in which non-controllable constitutive expression of the transgene has been one of the urgent problems to be solved.참고 자료
없음"Reproductive & developmental biology"의 다른 논문
- Effect of an Anabolic Steroid, Nandrolone Decanoate, on..7페이지
- 활성산소계가 돼지 정자의 기능에 미치는 영향6페이지
- Analysis of Differentially Expressed Genes in Cloned Bo..8페이지
- Percoll에 의한 미니돼지 정액내 세균 제거가 정자 성상과 수정란 분할에 미치는 영향6페이지
- Briliant Cresyl Blue 염색 방법과 극체 방출 여부에 따른 돼지 체외수정용 난포란 선..5페이지
- 비글(Beagle)종 개 정액의 성상 및 보존성4페이지
- 복제한우 폐조직에서 특이 유전자 발현에 관한 연구6페이지
- Comparison of Microtubule Distributions between Somatic..6페이지
- 돼지 체외수정란 및 단위발생란의 미세관 형성 및 메틸화 양상5페이지
- 생물학적 자극 통제 수단으로 활용하기 위한 돼지 페로몬 성 냄새 물질의 탐색 : N1-allyl-N..5페이지