생화학 제9판 제 13장

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목차

1. 핵산의 정제 및 검출
2. 제한효소
3. 클로닝
4. 유전공학
5. DNA 라이브러리
6. 중합효소연쇄반응
7. DNA 핑거프린팅
8. DNA의 염기서열 결정하기
9. 유전체학과 단백질체학

본문내용

13-1 핵산의 정제 및 검출
√핵산을 대상으로 한 실험에서 가장 필요한 것
① 혼합물에서 그 구성성분들을 분리하는 것
② 핵산의 존재를 검출하는 것
▶분리 기술
· 핵산을 분리하기 위한 일반적인 실험법은 겔 전기영동법
· 전하와 크기의 차이를 이용
· 시료를 지지용 매질에 넣고, 전극을 사용하여 매질에 전류를 통과시켜 크기별로 분리
· 지지용 매질 : 아가로오스(크기가 큰 분자들), 폴리아크릴아마이드(크기가 작은 분자들)
▶검출 방법
· 방사능으로 표지 : 질량수 32인 인의 동위원소, 질량수 35인 황의 동의원소
· 자가방사기록법 : 방사능으로 표지시킨 물질을 사진 필름에 노출시켜서 그 물질의 위치를 정할 수 있게 하는 기술
· 화학적 표지
- 발광 : 화학반응의 결과로 생긴 빛의 방사
- 형광 : 흡수된 빛이 재방사된 결과로 생긴 빛의 방사/형광화합물을 표지로 사용/에티듐 브로마이드 사용

13-2 제한효소
· 뉴클리에이스 : 핵산의 이인산결합을 분해
· 엔도뉴클리에이스 : 핵산의 내부 에스터 결합을 분해
· 엑소뉴클리에이스 : 핵산의 외부 에스터 결합을 단계적으로 분해
· 제한효소 : 뉴클리에이스 계열의 하나인데, 특정 지점에만 작용함
· 바이러스의 생장을 제한하는 숙주세포에는 제한효소가 있는데, 이 효소들은 특정 서열에서 파지 DNA 두 가닥을 모두 절단함
· 세포 내 염색체는 메틸화 되어 있기 때문에 자신이 갖고 있는 제한효소의 공격으로부터 보호됨
▶‘점착성 말단’을 만들어내는 제한효소들이 많다
· 회문 : 앞으로 읽거나 뒤로 읽어도 동일하게 읽히는 말
· 점착성 말단 : 이중가닥 DNA의 말단에 돌출되어 있는 짧은 길이의 단일가닥. 이 부위는 점착성 말단을 갖고 있는 다른 DNA 분자들과 연결될 수 있는 부위 역할을 함.
· 점착성 말단은 상보적인 염기들 간에 수소결합이 다시 형성되면 연결 가능
· 절단된 끝 부위 두 곳은 DNA 연결효소의 작용을 통해 공유결합으로 다시 이어짐

참고 자료

없음