[생화학]자외선 흡광도 및 diphenyl 분석법에 의한 DNA 농도 측정

소개글

생화학 실험 보고서입니다.

목차

1. 실험제목
2. 실험목적
3. 서론
(1) 자외선 흡광도 이용
(2) DNA의 정량
(3) Diphenylamine 분석법
4. 실험재료 및 방법
5. 실험결과
6. 고찰
7. 참고문헌

본문내용

1. 실험제목: 자외선 흡광도 및 diphenyl 분석법에 의한 DNA 농도 측정

2. 실험목적
자외선 흡광도법과 diphenylamine 분석법을 통해 DNA 농도를 측정해본다.

3. 서론
(1) 자외선 흡광도 이용
핵산, 뉴클레오티드 및 뉴크레오시드 등은 자외선(260nm)을 강하게 흡수하는데, 이것은 퓨린 및 피리미딘 염기의 공명구조 때문이다. 개개의 염기들은 각각 특징적인 자외선 흡수 스펙트럼을 가지며, 핵산의 총흡광도는 핵산을 구성하는 염기들의 총흡광도의 합과 같다고 생각할 수 있기 때문에 260nm에서 흡광도를 측정하여 DNA의 농도를 산출한다. 한편, 단백질이 강하게 흡수하는 280nm에서의 흡광도를 측정하여 A260/A280의 비를 계산함으로써 단백질에 의한 오염상태를 추정할 수 있다.

※ DNA 농도 계산 ※
◆ Double-stranded DNA 농도 (㎍/㎖) = 측정된 OD260 × 50㎍/㎖ × 희석배수

◆ Single-stranded DNA 농도 (㎍/㎖) = 측정된 OD260 × 36㎍/㎖ × 희석배수
OD: 흡광도

Tip. 260nm, 280nm에서 자외선 흡광도
ds DNA는 260nm와 200nm에서 똑같은 농도이다. ss DNA는 260nm, 250nm에서 농도이다. DNA 또는 RNA의 순수한 정도는 A260/A280의 비로 알 수 있다.

참고 자료

실험생화학