Western blot
- 최초 등록일
- 2008.05.04
- 최종 저작일
- 2007.10
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소개글
sds-page 다음 실험으로 살짝 이어집니다
목차
1.Indroduction
2.Materials and methods
3.Results
4.Discussion
5.My Idea
본문내용
1.Indroduction
Western blot은 SDS-PAGE에서 단백질을 분리한 후에 항원을 감지하는데 사용된다. SDS-PAGE 후, 단백질은 nitrocellulose membrane(단백질은 nitrocellulose membrane에 고정된다.)로 이동된다. 이 membrane은 nitrocellulose membrane 의 background를 막기 위해 5% non-fat dry milk solution에서 흡수된다. 이것은 background가 다음 단계 동안 항체에 붙는 것을 막는다.
블롯(blot)을 1차 항체(anti-BSA)유 결합하고 있다. 이 항체는 1차 항체와 반응 하는 것으로 항원-항체 복합체를 형성한다. HRP는 항원/1차 항체/2차 항체/HRP 복합체가 nitrocellulose membrane에 존재하는 데 감지하기 위해 더해진다.
다.
Goal
Anti-BSA와의 반응을 통해서 BSA의 Nitrocellulose blot을 분석할 수 있다.
2.Materials and methods
(1)Materals
-blotted nitrocellulose membrane
-blocking solution(5% non-fat dry milk)
-1° antibody(anti-BSA ed in rabbit)
-2° antibody(anti-rabbit IgG conjugated with HRP)
-substrate solution of HRP(Horse Radish Peroxidase)
참고 자료
없음