[식품공학]그람염색(Gram staining)-현미경에 의한 검경

소개글

혈구계수반(haematometer)을 이용하여 현미경으로 직접 균수를 세고 계산을 통해 총균수를 측정한 보고서 입니다.
이 방법은 생균과 사균 모두를 측정할 수 있고 단시간 내에 할 수 있는 장점이 있으며, 효모나 곰팡이의 포자와 같이 세포가 비교적 크고 액체 중에 단독으로 분산하는 것에 적용이 가능합니다.

Gram 양성균과 음성균의 염색차이 요인이 자세히 서술되어 있고 참고문헌과 각주가 모두 쓰여있어서 직접 책을 찾아보기도 좋을 것입니다.

목차

1. 실험 목적(purpose) 및 원리(principle)
2. 실험 재료(Materials) 및 기구(tools)
3. 실험 방법(Methods)
4. 실험 결과(Result)
5. 고찰(Discussion)
6. 비고(Remark)
▶ 미생물의 염색
▶ Gram 양성균과 음성균의 염색차이 요인
▶ 단일염색과 Gram염색의 차이점
▶ Gram염색의 실험방법상 오류
▶ 현미경
7. 참고문헌(References)

본문내용

1. 실험 목적(purpose) 및 원리(principle)

세균의 동정, 분류의 중요한 지표인 그람 양성균과 그람 음성균을 구분하고 동시에 분별염색의 원리와 조작법을 습득한다. 그리고 세균의 형태를 관찰하는데 필수적인 현미경의 구조를 이해함으로써 염료(dye)에 의해 염색된 균을 현미경으로 관찰하여 균의 특성을 밝힌다.

▶ 실험원리
그람염색은 세균의 동정 또는 구분에 쓰이는 방법 중 가장 중요한 것의 하나로, 결과에 따라 그람양성과 그람음성의 두 군으로 세균을 대별한다. 그람염색은 세균을 Crystal violet 의 염로에 염색시킨 후에 알코올로써 탈색시키는 동안에 Crystal violet 의 자주색 이 탈색되면 그람음성으로, 탈색되지 않고 자주색이 남아 있어서 관찰이 잘되면 그람양 성으로 정의하고 있다. 그람음성은 알코올로서 탈색 처리가 끝나고 붉은색의 Safranin 으 로 2중 염색을 시켜 보면 분홍색으로 염색되는 것이 특징이다.



E.coli, B. subtilus 및 직접 배양한 미생물

test tube rack
백금이, alcohol ramp
carnet poncette
cover glass, slide glass, 스포이드
microscope
crystal violet, lugol 액, safranin 용액, ethanol(95%), 증류수

2. 실험 재료(Materials) 및 기구(tools)



3. 실험 방법(Methods)


(1) Order
도말 → 건조(drying) → 고정(fixing) → 염색

- 도말면위 A(crystal violet dor) 액으로 1분 염색
→ 뒷면 수세 → 물기제거 → B(lugol 액) 액에서 1분간 염색
→ 뒷면 수세 → 물기제거 → 95% alcohol로 탈색
→ 뒷면 수세 → 물기제거 → C(safranin 액) 액에서 10초간 염색
→ 뒷면 수세 → 건조 → 검경

참고 자료

▷ <식품미생물학 및 발효식품학 실험>, 김정환 외 3, 지구문화사, 2004년, 37~38p
▷ <식품미생물학 실험서>, 박신인 외 1, 도서출판 효일, 2004년, 80~81p
▷ <식품미생물학실험>, 방병호 외 3, 진로연구사, 1999년, 38p