[유전공학] DNA 탐침

목차

Ⅰ. Introduction
(1) 특이성과 감도를 고려한 탐침의 조제영역의 선택
(2) 탐침의 서열과 2차 구조
Ⅱ. Materials
Ⅲ. Methods
Ⅳ. Result
Ⅴ. Discussion

본문내용

특정 병원체나 유전자를 검출 또는 동정하기 위한 DNA 탐침은 수천 염기쌍의 크기로부터 인공적으로 합성한 짧은 단편(oligonucleotide ; 20~40base)에 이르기까지 다양하며 실험목적에 따라 그 길이를 선택할 수 있다. 또한 탐침의 염기서열이나 표지방법도 목적에 따라 선택기준이 다르며 적절한 사용기준이 필요하다.

(1) 특이성과 감도를 고려한 탐침의 조제영역의 선택
DNA 탐침으로 검출계를 조제하는 경우 조제하는 영역의 배열 특이성과 감도가 문제가 된다. 병원체의 검출에 사용하는 DNA 탐침에는 독소나 병원성을 지배하는 유전자영역이 많이 이용되어 왔다. 그것은 그 유전자영역이 그 병원체에 특이적으로 분포하고 있기 때문이다. 또한 높은 감도를 요구하는 검출계에서는 유전자의 수(copy)를 고려해야 한다. 병원체의 염색체나 플라스미드에는 반복되는 여러 개의 삽입서열(insertion sequence)이 존재하며 반복된 서열의 수에 비례하여 감도가 상승한다. 대표적인 것으로 결핵균이나 황색 포도상 구균의 삽입서열이 잘 알려져 있다. 또한 rRNA의 유전자도 염색체 상에 여러 군데 존재한다. 일반적으로 증식을 하는 세균의 경우 rRNA의 수가 수천에서 수만 개이기 때문에 이 RNA를 검출하는 탐침을 만들어 염색체 상 한 개의 유전자를 검출하면 수천, 수만 배 감도가 상승하게 된다.

참고 자료

없음