[A+레포트] 효소활성도 측정 ( Glutathion peroxidase ; GPx)

소개글

A+를 받은 자료로, 영양생화학 실험에서 효소 활성도를 측정한 레포트입니다.
이론 및 내용을 아주 충실하게 담았고(레포트만 봐도 내용이해가능), 중간 기말 시험대비용 자료로도 훌륭할것입니다.
실험 결과 및 사진, 표 자료 첨부등 도움이 많이 되실거라고 생각합니다.

목차

1.주제

2.재료 및 기구

3.실험 목적 및 원리

4.실험 방법

5.1.실험 결과
5.2.이론

6.고 찰

7. 참고문헌

본문내용

1.주제
Glutathione Peroxidase 활성 측정

2.재료 및 기구
기구
96 well plate, pipette, centrifuge, spectrophotometer
시약
PBS, calibrator, d.w,
Working reagent ( assay buffer, glutathione, NADPH, GR enzyme)
H2O2 , Gpx (glutathione peroxidase), sample (1~4)

<중 략>

5. 이 론
효소 활성도 측정의 기초
효소는 생체 내에서 화학반응이 일어날 때 활성화 에너지를 낮추므로써 반응 속도를 1015배까지도 빠르게 할 수 있는 촉매활성을 갖는 단백질이다. 대부분의 효소의 활동성은 효소와 기질의 농도 외에 온도, 용액의 pH, 이온 강도(ionic strength), 완충액의 종류, 이온들의 종류, 불순물들(무기질, 유기질, 다른 효소들)에 의해 영향을 받는다. 때로는 보조인자가 필요한 효소들도 있으며 효소의 작용이 조절인자에 의해 저해되거나 촉진되기도 한다.
실험 수행조건을 조절하면 효소에 의한 반응 속도를 편리하며 재현성 있게 측정할 수 있다. 이때에 일정한 시간 안에 비례적으로 생성물이 형성되어야 하는데 대부분 기질 농도(필요하면 보조인자도)가 효소농도에 비해 충분한 상태에서 얻어지는 초기반응속도 측정을 이용한다.
효소의 농도가 일정할 경우, 효소에 의해 촉매되는 반응의 초기 속도는 기질의 농도가 증가함에 따라 증가하나 기질의 농도가 포화 상태에 도달했을 때 초기속도는 더 이상 증가하지 않는다. Michaelis-Menten식으로 단일기질을 사용하는 효소반응에서 이를 보면 다음과 같다.

<중 략>

6.고 찰
이번 실험에서는 H2O2를 H2O로 분해하는 Gpx(glutathione peroxidase)의 효소 활성도를 측정하였다.
Gpx 는 대표적인 항산화효소로서 평소 GSH(환원형)으로 존재하다가 H2O2를 환원시키면 GSSH(산화형)가 된다. 이 GSSH는 G.R(glutathione reductase)에 의해 NADPH를 사용하여 GSH로 환원된다.

참고 자료

윤진숙 외, 실험 영양학, 형설출판사, 2000.
김현숙 외, 최신 영양생화학 실험, 효문사, 2005.
한국식품영양과학회, 식품영양실험핸드북(영양편), 도서출판 효일, 2000.
황안국, 영양생화학, 한올출판사, 1998.
한국생화학회, 실험 생화학, 탐구당, 1999.