DNA_정량[1][1]
- 최초 등록일
- 2012.11.21
- 최종 저작일
- 2011.10
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소개글
DNA정량
목차
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본문내용
DNA 정량
Base pair
: Two nucleotides in an RNA or a DNA molecule that are paired by hydrogen bonds
: G-C / A-T
DNA 구조
DNA는 4개의 염기로 구성 되어져 있다. (A, T, G, C)
DNA는 이중나선 구조 : 매우 안정적
DNA의 합성 방향은 항상 5’->3’ 방향이다.
DNA Structure
DNA 구조 ? Double helix
Central Dogma
DNA replication (복제)
- DNA repair / recombination
- 세포분열
2. DNA Transcription (전사)
- RNA synthesis
3. RNA Translation (번역)
- Protein synthesis
<중 략>
실험방법
1. 준비된 DNA, RNA 시료(Lyophilized powder)를 각각 TE buffer와 DEPC-treated water에 녹인다.
2. 각 시료를 녹인 완충액에 적절히 희석 시킨다.
:Total volume/시료의 volume = dilution factor
3. 준비된 시료에서 A260 값을 측정한다.
4. 시료의 농도를 계산한다.
Blotting
제한조각들(제한효소로 쪼개서 얻은 조각들)은 겔 전기이동법으로 분리 할 수 있다.
특유한 염기 순서를 함유하는 제한 조각들은 표지된 상보적 DNA/RNA가닥과 혼성체를 형성시켜 확인 할 수 있다.
→ Probe를 사용
DNA Probe
DNA 탐침(Probe)는 분자량이 32인 인으로 표지한 단일가닥이다.
→분자량이 32인 인(32P)는 방사성 동위 원소이다.
탐침은 상보적 순서를 가진 제한 조각과 혼성체화하며 자동 방사선 사진법을 사용하면 탐침의 염기 순서에 상보적 염기 순서를 가진 제한 조각의 위치를 알 수 있다.
참고 자료
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