생화학실험보고서 (PCR을 이용하여 MFG-HSVtk로부터 HSVtk 유전자의 대량 생산)
- 최초 등록일
- 2012.01.27
- 최종 저작일
- 2010.11
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소개글
PCR을 이용하여 특정 유전자를 대량 생산해보는 실험이었습니다.
PCR의 원리와 각종 용어의 정의가 포함되어 있습니다.
목차
1. 실험 제목
2. 실험 일시
3. 실험 목적
4. 실험 재료 및 기구
5. 실험 이론과 원리
6. 실험 방법
7. 실험 결과
본문내용
5. 실험 이론과 원리
· PCR(Polymerase chain reaction)
- 원리 : 중합효소 연쇄반응은 이미 알려진 특정 DNA 부위를 두 개의 primer를 이용하여 특이적으로 반복 합성하여 시험관 내에서 원하는 DNA분자를 증폭시키는 방법으로서, 미량의 DNA를 106배의 다량의 DNA를 얻을 수 있는 기법이다. 이 방법을 사용하여 genomic DNA와 같은 거대한 DNA로부터 원하는 DNA 부분만을 선택적으로 증폭시킨 후 일반적으로 사용되는 agarose gel이나 polyacrylamide gel 상에서 뚜렷하게 보이는 띠로 가시화 할 수 있다.
- 과정
1단계 : denaturation of template DNA
90˚C~96˚C에서 dsDNA를 ssDNA로 분리시킨다. 온도가 높을수록 denaturation이 쉽게 일어나지만 taq polymerase도 온도가 아주 높 은 상태에서는 activity가 감소할 수 있다.
2단계 : annealing
50˚C~60˚C에서 primer 염기 서열의 GC 비율에 따라 온도에 변화 를 준다. taq polymerase가 template에 결합하여 새로운 dsDNA가 생성되기 시작하는 단계이다.
3단계 : extension
70˚C~74˚C에서 DNA 중합 반응을 진행한다.
참고 자료
없음