GOT, GPT 측정 실험 보고서

소개글

영양학 실험 보고서 입니다.
실험 원리와 실험방법, 그리고 결과를 분석해 그래프로 나타내고
고찰한 내용 포함되어있습니다.

목차

<실험명 : GOT/GTP 측정>
실험원리
실험기구 및 시약
실험방법
결과 및 고찰
※참고문헌

본문내용

<실험명 : GOT/GTP 측정>
실험원리
기질이 α-Ketoacid와 Alanine인 것은 효소(GPT)에 의해 Glutamic acid 및 Pyruvic acid로 된다. GOP, GTP 모두 Pyruvic acid를 생성하므로 발색시약(2,4-Dinitrophenyl Hydrazine)을 작용시키면 Hydazone을 생성하는데 여기에 0.4N-NaOH 용액을 가해 등갈색으로 발색시킨다. 505㎚에서 흡광도를 측정해 미리 작성한 표준곡선에 의해 Transaminase의 활성치를 구한다.

실험기구 및 시약
시험관, spectrophotometer, 증류수, incubator, 피펫, Voltex
․GOT용 기질액, GTP용 기질액, 정색시약, 0.4N NaOH용액, 표준용액

실험방법

-표준용액을 이용한 표준곡선의 작성법-
① 4.0N-NaOH 용액을 증류수에 10배 희석한다.
② 각 시험관에 다음 용액을 잘 혼합한다.
③ 잘 혼합하여 실온에 20분간 둔다.
④0.4N-NaOH용액(㎕) 실온에 10분간 방치 후, 60분 이내에 증류수를 대조로 파장 505㎚(490~530㎚)에서 흡광도 측정한다.

-GOT 측정방법-
1) 기질액 100㎕를 37℃에서 5분간 incubation한다.
2) 혈청 20㎕를 잘 혼합하여, 37℃에서 60분간 incubation한다.
3) 정색 시약 100㎕를 잘 혼합하여, 실온에 20분간 세워둔다.
4) 0.4N NaOH용액 1000㎕ 잘 혼합하여, 실온에 10분간 세워둔다.
5) 60분 이내에 505㎚(490~530㎚)에서, 증류수를 대조로 흡광도를 측정한다.

참고 자료

① 수업자료
② http://blog.daum.net/ipcshopping/5592820
③ http://blog.naver.com/daeboo108?Redirect=Log&logNo=70084963797