Immunostaining(면역염색법) 결과레포트

소개글

생명과학과 전공실험에서 진행한 실험 결과 레포트 입니다:)
A+ 받은 레포트이며 조교님께 완성도있다는 칭찬을 받았던 레포트입니다.

상세하게 적은 부분이 많고 이론, 실험재료나 방법들도 보시면 아시다시피
처음보는 사람도 이해할 수 있게 자세하고 폭넓은 정보를 적으려한게 느껴지실 겁니다.

책을 하나하나 찾아보며 적은 것이기 때문에 참고문헌 각주표시도 되어있습니다.

참고하시면 반드시 도움이 되실거라 생각합니다.
이 보고서를 보신 분은 꼭 A+ 받으시고 좋은 하루 되세요 ㅎㅎ 감사합니다:)

목차

1. 실험목적

2. 실험원리

3. 실험재료 및 방법
1) 실험재료
2) 실험기기 및 장비
3) 실험방법

4. 결과

5. 고찰

6. 참고문헌

본문내용

*Immunocytochemistry 면역형광염색법
항원-항체 반응을 기반으로 한 세포 안에서 일어나는 현상을 관찰할 때 사용하는 기법이다. 조직 수준에서 관찰할 때에는 immunohistochemistry라고 한다. 항원-항체 반응 중에서도 Direct immunofluorescence(직접 표식법)와 Indirect immunofluorescence(간접 표식법 or secondary detection)가 있다. Direct의 경우 항원과 형광물질이 달려있는 항체가 반응하면서 형광이 관찰되는 방식을 말하고 indirect의 경우 항원과 항체가 반응한 뒤 이 1차 항체의 FC그룹을 인식하는 2차 항체가 반응하여 2차 항체에 달려있는 형광물질로 인해 형광이 관찰되는 방식을 말한다. 1차 항체가 붙고 2차 항체가 붙어야 한다는 점에서 indirect라고 한다.
직접 표식법은 항원-항체 반응이 1회에 되기 때문에 조작의 어려움과 시간이 적지 않게 걸리고 비특이적인 염색이 적게 나타난다. 각종 항체에 따라 표식해야 하는 반면 표식 반응에 따라 항체가 활성이 실활되는 경우도 적지 않다. 간접 표식법은 일차 항체를 제작한 동물종에 대한 표식 이차항체를 사용하기 위하여 시판된 제품을 구매할 수 있다. 또 항원-항체 반응을 2회 반복하기 위해 항원 1개에 복수의 표식이차 항체가 결합한 결과 반응이 증강되어서 강한 염색상이 관찰된다. 그러나 손이 많이 가고 시간이 걸리며 비특이적인 반응이 나타나기 쉽다.
형광항체법은 형광색소를 항체의 marker로 사용하는 방법으로, 형광 현미경이 필요하지만 선명한 염색상은 설득상이 있고 미량의 항원 검출에 유용하다. 그러나 단시간에 퇴색하기 때문에 그 전에 기록하는 것이 중요하다.

*Antigen-antibody binding
항원-항체 결합반응은 매우 특이적이다. 항체는 Heavy chain과 light chain이 있다. 이들은 Disulfide bonds를 이루고 있다. 항체의 heavy chain FC쪽은 불변하는 영역인 반면 light chain은 항원이 결합하는 부위로 가변하는 영역이다. 이곳에 항원을 인식할 수 있으며 특정 항원만을 결합할 수 있기 때문에 특이성이 높은 반응이 일어날 수 있다.

참고 자료

강호일, 2007, 단백질실험핸드북, pp.172-174, 월드사이언스.
김승호 외1, 2006, 단백질실험노트(하) 제3판, pp.127, 월드사이언스.