[생명공학] RNA extraction, cDNA synthesis, qRT PCR
- 최초 등록일
- 2023.03.14
- 최종 저작일
- 2022.03
- 4페이지/ MS 워드
- 가격 1,000원
소개글
"[생명공학] RNA extraction, cDNA synthesis, qRT PCR"에 대한 내용입니다.
목차
I. Introduction
II. Methods
1. RNA extraction
2. cDNA Synthesis
3. qRT-PCR
III. Discussion
1. RNA extraction
2. cDNA synthesis
3. Inhibitors for qRT-PCR
본문내용
PCR이라는 아주 간단한 DNA 복제 원리를 이용한 기법이 개발된 이후 연구자들은 원하는 서열의 DNA를 마음껏 증폭시킬 수 있게 되고 이로인해 유전공학과 분자생물학은 혁명적으로 발전하게 된다. 하지만 DNA는 실제로 모든 부분이 단백질로 발현되는 것은 아닌데 exon이라는 실제 단백질의 서열을 지정해주는 부분과 intron이라는 단백질을 지정하지 않는 부분이 섞여있다. 그렇기에 DNA 자체의 서열은 발현되는 단백질의 특징을 알아내는 데에 한계가 존재한다. 즉, 직접 발현되는 정보를 알고싶다면 리보솜에 의해서 번역되는 RNA의 서열이 중요하다. 하지만 알다시피 RNA는 단일 가닥의 서열이고 RNA는 DNA에 비해 불안정하기 때문에 이 자체로 증폭을 시키기가 어렵다. 그렇기 때문에 RNA를 DNA로 바꿔 주는 과정이 필요하다.
참고 자료
Rio, D. C., Ares, M., Hannon, G. J., & Nilsen, T. W. Purification of RNA using TRIzol (TRI reagent). Cold Spring Harbor Protocols, 2010(6), pdb-prot5439. 2010.
Chomczynski, P., & Sacchi, N. The single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate–phenol–chloroform extraction: twenty-something years on. Nature protocols, 1(2), 581-585. 2006.
G F Gerard, et al., Reverse transcriptase. The use of cloned Moloney murine leukemia virus reverse transcriptase to synthesize DNA from RNA, Mol Biotechnol., 8(1):61-77, 1997
Stephen A. Bustin & Reinhold Mueller, Real-time reverse transcription PCR(qRT-PCR) and its potential use in clinical diagnosis, clinical science, 109, 365-379, 2005
Mark A. Valasek & Joyce J. Repa, The power of real-time PCR, Adv Physiol Educ 29: 151-159, 2005