생화학 실험 보고서 리보플라빈 흡광도 측정 Colorimetry 분광광도계

소개글

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목차

Ⅰ. 실험목적

Ⅱ. 실험원리

Ⅲ. 실험도구

Ⅳ. 실험방법

Ⅴ. 결과
1. Absorption Spectrun of Riboflavin
2. Riboflavin의 Standard Curve 작성과 미지샘플의 농도 측정표

Ⅵ. 토의

본문내용

실험목적
∙ 분광광도계를 사용하여 리보플라빈의 흡광도를 측정하여 리보플라빈의 최대 흡수 파장을 알 수 있다.
∙ 분광법, Lambert 법칙, Beer 법칙, Lambert-Beer 법칙을 이해한다. Lambert-Beer 법칙의 개념을 사용해 최대 흡수 파장 E값을 구한다.
∙ 정량실험에 대해 이해하고, 미지농도의 리보플라빈 용액의 흡광도를 조사해 리보플라빈 정량분석을 해본다.
∙ 몰흠광계수가 농도에 무관한 상수임을 증명할 수 있다.

실험원리
∙ 분광법: 자외선 또는 가시광선이 분자에 흡수된다.
1) 분광광도법: 분자에 의해서 흡수된 빛의 양을 측정
2) 형광분석법: 흡수된 광에너지의 운명을 관찰

∙ Lambert 법칙: 투과도와 거리 사이의 관계, 매질에 의해 흡수된 입사광의 비율은 입사광의 강도와는 무관하고, 또 매질의 각 연속적 단위층은 그것을 통과하는 빛의 동등한 부분을 흡수한다.

<중 략>

실험방법
∙ colorimetry 1. Absorption Spectrun of Riboflavin
① 5.32 x M Riboflavin 용액 약 40ml를 준비한다.
② 증류수만 채운 큐벳을 분광광도계에 넣어 400nm에서 흡광도 0으로 맞춘다.
③ 리보플라빈을 큐벳에 넣고 400nm에서 리보플라빈의 흡광도를 측정한다.
⓸ ②, ③ 과정을 10nm 간격으로 420~480nm 범위에서 측정한다.
⓹ 수치를 기록하고 450nm에서 가장 최대 값을 가지는지 확인한다.
⓺ 그래프 용지에 Riboflavin Absorption Spectrun을 그린다. (x축 파장, y축 흡광도)
⓻ 450nm의 흡광도 값을 사용해 Lambert-Beer 법칙(A=Ecl)으로 리보플라빈의 몰흡광계수를 구한다.

∙ colorimetry 2. Riboflavin의 Standard Curve
① Riboflavin 용액과 증류수를 사용하여 총 6 가지의 용액을 조제한다.

참고 자료

생화학 실험교재