생명공학 'Accelerated FRET-PAINT microscopy' 영어논문 해석 (Molecular Brain)
- 최초 등록일
- 2021.04.29
- 최종 저작일
- 2018.11
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목차
1. 개요
2. 소개
3. 결과
4. 토론
5. 방법
본문내용
광학 현미경의 회절 한계를 극복하기 위해 다양한 유형의 초고해상도 형광 현미경 기술이 개발되었다[1-7]. 그러나 이러한 성과는 영상 속도와 전체 관찰 시간을 희생시켜 얻었으며, 광학 분해능이 높아지면 영상 속도가 전반적으로 느려지고 투시 진단의 포토블링 문제가 악화되어 총 영상 시간이 제한된다. DNA-PAINT (Nanoscale Topography [8]의 촬영 지점 누적) 기술은 표적 (이미저 Strand)을 DNA에 결합하기 위해 형광 라벨로 표시된 짧은 DNA Strand의 과도 결합을 사용하여 광블링 문제를 극복했다.
그러나 DNA 프로브의 결합 속도는 악명 높을 정도로 느리고, 그 결과, DNA-PAINT는 매우 느린 영상 속도를 가지고 있어 생물학적 이미징에서 DNA-PAINT의 광범위한 사용을 방해한다.
DNA-PAINT의 이 문제를 해결하기 위해, FRET-PAINT 현미경 검사는 두 개의 그룹에 의해 독립적으로 도입 되었다.
이 기술에서는 기증자와 수신자가 표시된 두 개의 짧은 DNA 가닥이 형광 프로브로 사용된다. 단일 분자 국소화에만 수용기 신호만 사용되기 때문에 DNA-PAINT [10]에 비해 영상 속도가 30배 증가하여 더 집중될 수 있다.
FRET-PAINT의 영상 속도는 카메라 속도, DNA 프로브의 분리율, DNA 프로브의 최대 농도에 의해 영향을 받는다.
본 논문에서는 FRET-PAINT 이미징의 속도 한계에 도달하기 위해 세 가지 요인을 최적화했으며, 그 결과 40nm 해상도를 수십 초 안에 제공할 수 있는 초고해상도 형광 현미경을 보고했다.
이 과정에서 우리는 이전에 특성화되지 않은 사진 유도 DNA 프로브의 손상을 인식했고, 현재 FRET-PAINT의 영상 속도와 관찰 시간을 모두 제한했다.
결과
기증자 가닥의 가속 해리
FRET-PAINT의 실험계획과 계기설정은 그림 1a에 간략히 제시되어 있다. 이전 연구
참고 자료
Accelerated FRET-PAINT microscopy - Jongjin Lee, Sangjun Park & Sungchul Hohng
https://molecularbrain.biomedcentral.com/articles/10.1186/s13041-018-0414-3