일반생물학실험1 _ DNA cloning - Ecoli 형질전환 (A+)

소개글

2018-1 일반생물학실험1 과목
A+ 실험보고서

목차

A. Introduction
1. 실험목적
2. 이론 배경
1) 형질전환
2) competent cell

B. Methods&Materials
1. 실험재료
2. 실험방법

C. Results

D. Discussions
1. 형질전환이 잘 이루어졌는가? 그렇게 생각하는 이유는?
2. 이번 실험에서 사용한 plate에는 ampicillin이 포함되어 있다. 만일 ampicillin이 들어있지 않은 plate를 사용했다면 어떤 결과가 나타났을까? 그 이유는?

본문내용

A. Introduction
1. 실험목적
1) 형질전환의 원리와 방법에 대해 알아보고 이해한다.
2) DNA insert를 vector에 ligation한 plasmid DNA를 형질전환에 사용하여 subcloning이 제대로 이루어졌는지 확인한다.

2. 이론 배경
1) 형질전환 (transformation)
원래의 세포가 가지고 있던 것과 다른 종류의 유전자가 있는 DNA 사슬 조각 또는 plasmid가 세포들 내부로 침투되어 개체나 세포의 형질이 유전적으로 변화하는 현상이다. 형질전환을 위해서 competent cell이 필요하다.
Transformation의 방법에는 heat shock, electroporation, microinjection, lipofection, particle bombardment, particle bombardment의 5가지 방법이 있다.

2) competent cell
Competence는 세포가 외부의 DNA를 받아들이는 능력으로 competent cell은 competence를 갖고 있는 세포를 의미한다. Transformation을 위해서는 DNA가 세포막을 통과할 수 있어야 하므로, competent cell을 사용해야 한다.

B. Methods& Materials
1. 실험재료
Competent cell(DH5α), DNA, ep-tube, ice, heat block, LB media, LA plate, RT centrifuge, spreader, 알코올램프, pipet

참고 자료

정주혜 외 4명, 『고등학교 생명과학 실험』, 서울특별시교육청, 2013.