transfer, membrane staining, cutting에 관한 레포트
- 최초 등록일
- 2021.01.13
- 최종 저작일
- 2020.10
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소개글
"transfer, membrane staining, cutting에 관한 레포트"에 대한 내용입니다.
목차
1. 실험 목적
2. 실험 과정
1) Transfer
2) Staining & cutting
3. 실험 결과
1) Transfer 과정 중 sandwich를 역순으로 제조 시 발생하는 결과 및 원인을 설명할 것.
2) Coomassie brilliant blue와 amido black을 비교할 것
3) Transfer가 끝난 단백질 중, 정량하고자 하는 것이 45kDa일 때의 cutting 방법을 기술할 것
본문내용
1. 실험 목적
: 전기영동을 통해 전개된 단백질들중 CYP2E1의 발현량을 알아본다.
2. 실험 과정
#1. Transfer
: running으로 전개된 단백질들을 membrane에 옮기는 과정.
제대로 옮기기 위해서는 위와 같은 순서로 배열을 해주어야 단백질들이 새어나가지 않습니다.
이 순서를 sandwich라고 부릅니다.
◆실험도구
: 전기영동장치, transfer buffer, filter paper, nitrocellulose membrane, tank, tray, sponge, cassette, 핀셋, gel 전용 칼, running이 종료된 gel
1. Transfer buffer를 tray에 부어줍니다
2. Cassette의 검정부분이 바닥에 닿게 tray에 넣어줍니다.
3. 검정 cassette위에 sponge를 넣어줍니다. (sponge는 transbuffer에 담긴 상태로 보관되므로 그대로 사용합니다.)
4. Filter paper를 transfer buffer에 묻힌 후 sponge위에 올립니다.
5. Running이 끝난 tank에서 gel만 분리합니다.
참고 자료
https://biotechnology.tistory.com/34
https://www.ibric.org/myboard/print.php?id=38718&Board=exp_qna&MyNavi=
