[실험프로토콜] IHC (ImmunoHistoChemical Staining) 대조군 잡는 방법

소개글

IHC (ImmunoHistoChemical Staining)를 할때 가장 중요한 조건잡는 방법입니다.
조건을 잡지않고 IHC를 하는 것은 아무 필요없기에 먼저 확인해야하는 것을 체크해두었습니다.
조건이 잡히지 않거나 처음 IHC를 접하는 사람들에게 필수적으로 알아야 할 방법입니다.
이를 그림으로 자세히 나타냈기에 쉽게 이해할 수 있을 것입니다.

목차

1. Negative, Positive control cell or tissue check
2. Cancer, normal 각각 2개 정도의 sample을 준비
3. Retrieval solution check
4. Staining
5. labeling

본문내용

1. Negative, Positive control cell or tissue check.
- Antibody 염색여부 확인.
2. Cancer, normal 각각 2개 정도의 sample을 준비.
- cancer 1, 2 : 한 sample당 3개정도 필요 → 1-1, 1-2, 1-3, 2-1, 2-2, 2-3
- normal 3, 4 : 한 sample당 3개정도 필요 → 3-1, 3-2, 3-3, 4-1, 4-2, 4-3
3. Retrieval solution check.
- 일반적으로 Number 4. 9. 6 이용.
- antibody에 Data sheet에 적혀 있음.
4. Staining
1) 1'antibody의 농도를 다르게 check.
ex) 1:50-1:500의 경우
- 1:100, 1:200, 1:400을 이용.
- 2배로 늘리는 방법을 추천.
- DAB의 경우에도 일정시간으로 결정. (Dako의 경우 2-3min으로 반응)
- 특정 시간을 결정하여 두 개가 구분할 수 있는 농도로 결정함.

참고 자료

없음