Lab 2. 종이크로마토그래피를 이용한 아미노산의분리

목차

1. Amino Acid
2. Thin Layer Chromatography
3. 참고문헌
4. 문제 풀이

1. 실험목적
2. 실험재료
3. 실험방법
3. 실험결과
4. Discussion
5. 참고문헌

본문내용

1. Amino Acid

1) Amino Acid 의 분류

: 각 아미노산은 카복시기, 아미노기 및 α 탄소원자에 결합되어 있는 독특한 곁사슬(R)을 가지고 있다. 이 곁사슬의 성질에 따라 산성, 염기성, 극성, 비극성의 네 가지 종류로 구분된다.

① 극성 아미노산

시스테인 및 타이로신의 곁사슬은 알칼리성 pH에서 양성자를 잃을 수 있지만 이들 아미노산은 중성 pH에서 전하가 0이다. 세린, 트레오닌 및 타이로신은 각각 수소결합에 참여할 수 있는 극성 하이드록시기를 가지고 있다.
- 이황결합 : 단백질에서 두 개 시스테인의 -SH잔기가 산화되어 이합체인 시스틴을 생성하며, 이황결합(-S-S-)이라고 칭하는 교차공유결합을 가지고 있다.
- 기타 화합물 : 세린, 트레오닌 및 드물게 타이로신은 인산기와 같은 구조에 대한 결합부위로써 작용할 수 있는 극성하이드록시기를 가지고 있다.

<중 략>

① TLC판 내에서 Amino acid 종류에 따라 그 Rf가 다른 이유?

이 실험에서 정지상(실라카 젤)은 강한 극성이다. 따라서 좀 더 강한 극성을 띄는 물질일수록 실리카 젤 층에 잘 흡착되어 전개 용매가 이동하는 동안 상대적으로 느리게 이동해 얇은 층 크로마토그래피 판 아래쪽에 흡착되고 극성이 약한 물질일수록 실리카 젤 층에는 덜 흡착되어 위쪽에 흡착되게 된다.

따라서, 위 결과로 보았을 때, Lys > Ala > Gly > Thr > Leu 순서로 극성이 강한 것을 알 수 있다.

② Solution에 따라 그 Rf가 다른게 나온 이유?

이 실험에서 Solvent A는 산성이고 Solvent B는 염기성이다. 따라서 용매에 대한 친화력에 따라 그 Rf값이 달라질 것이다. 즉, 산성을 띈 Amino Acid는 B에서 보다 A에서 더 큰 Rf값이 나타날 것이고,
염기성을 띈 Amino Acid 는 A에서 보다 B에서 더 큰 Rf값을 나타나게 될 것이다.

참고 자료

http://petiteciel.tistory.com/entry/Lab-종이크로마토그래피를-이용한-아미노산의-분리
http://en.wikipedia.org/wiki/Ninhydrin
www.younglin.com/Application/pdf/kor/APP-0400-001.pdf