미생물 실험 결과 report Growth kinetics and Carbon Metabolism of Bacteria

소개글

미생물 실험 결과 레포트입니다~
실험 과정, 결과, 디스커션 상세합니다
레포트 점수 A 받았습니다

목차

1 Purpose
2 Materials
3 Procedure
4 Observation & Data
5 Discusison
6 Question
7 Reference

본문내용

Procedures
[ Cell Cultivation ]
1. Corynebacterium glutamicum colony를 따서 액체 BHI medium이 담긴 test tube에서 전배양한다.
⇒ 30℃, 200rpm에서 Over night 시킨다.
test tube를 2개 만들어서 더 잘 자란 것을 선택하여 cell growth curve 실험에서 사용한다.

[ Cell growth curve ]
1. Corynebacterium glutamicum균이 자란 test tube에서 1ml을 취하여 BHI medium이 들어있는 삼각 Flask에 담는다.
⇒ 호기적(30℃, 200rpm), 혐기적(30℃, 50rpm) 조건에서 키워야 하므로 각각 다른 삼각 Flask 한 개씩, 총 두 개의 Flask에 배양액을 담는다.
2. 2시간 간격으로 Shaking incubator에서 배양 중인 삼각 Flask를 꺼내서 1ml씩 취하여 e-tube에 담는다.
3. O.D 측정을 위해서 증류수로 Blank를 잡고, 채집한 배양액 1ml을 vortexing 해준 후 새로운 cuvette에 옮겨 담아 O.D를 측정한다.
⇒ O.D가 0.25가 넘으면 희석해준다. (2, 4, 5, 10, 20, 25, 40, 50, 100배 희석)
단, 50배가 넘어갈 때에, 예를 들어 50배 희석을 한다고 하면, 희석방식을 1:49로 하면 오차가 커지므로, 5배 희석 액을 10배 희석하거나, 10배 희석 액을 5배 희석하도록 한다.

[ 당 분석 ]
1. Cell growth curve 실험의 2번 방법에서와 같이 2시간 간격으로 당 분석을 위한 시료 1ml를 호기적, 혐기적 조건의 배양액으로부터 채집한다.
2. 배양액 1ml가 담긴 e-tube를 원심분리기에서 13200rpm, 2분간 원심 분리한다.
⇒ 원심분리기에서는 고 rpm으로 회전을 시키기 때문에 안전성을 높이기 위해 e-tube를 대칭이 되도록 2개 씩 원심분리기에 넣어준다.

참고 자료

없음