[인천대 생명공학실험3 A+] Dotblotting 실험결과 보고서 [Horseradish Peroxidase(HRP)와 Luminol/항원-항체 반응/Chemiluminescence]

소개글

A+를 쉽게 받을 수 있도록 매우 정리가 잘 되어 있는 효소 동역학적 분석, Michaelis-Menton 실험결과 보고서 입니다.
Dot blot, Horseradish Peroxidase(HRP)와 Luminol, Membrane, Blocking과 wash, 항원-항체 반응,Chemiluminescence 에 대한 이론을 포함하고 있습니다.
이론 외에 실험결과와 오차의 원인까지 포함한 고찰 및 결론 또한 체계적으로 꼼꼼히 적혀있습니다.

목차

1. Date
2. Title
3. Purpose
4. Principle
5. Materials & Methods
6. Result
7. Discussion
8. Conclusion
9. Reference

본문내용

3. Purpose
Dot blotting의 항원항체 반응을 이용해 단백질의 존재를 확인한하고 기술과 원리를 습득한다.

4. Principle
Dot blot: 이번실험에서는 항원항체 반응을 이용해 이미 Elution된 eGFP의 단백질 검출 실험을 진행할 것이다. Positive control(PC), Elution eGFP, 10배 희석한 Elution eGFP, Negative control DW를 사용하며 PC, eGFP, 10배 희석 eGFP에서 점(dot)가 발견될 것이다. Anti-His-tag 1차항체를, 1차 항체와 결합하는 HRP linked 2차 항체를 사용할 것이며 1차항체는 eGFP의 histidine epitope과 결합하여 항원 항체반응이 나타날 것이다. (Fig. 1.)

참고 자료

Robert F. Weaver. et al., 분자생물학, 2013, 라이프사이언스 p169, 185-188
Cambell et al., 캠벨 생명과학 11th, 2019, 바이오사이언스, p79, 101,102, 708, 812
김평현 et al., 면역화학 및 항체공학 방법론, 2010, 강원대학교출판부, p61, 74, 176