분자생물학 연구방법론 필기자료
- 최초 등록일
- 2020.12.31
- 최종 저작일
- 2018.04
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소개글
연세대학교 의과학과 분자생물학 연구방법론 필기 요약집 입니다.
목차
1. DNA는 4 개의 염기로 구성
2. DNA의 구조
3. Restriction enzyme (endonuclease)
4. Restriction-Modification (R-M) system
5. Ligation
6. Joining of vector to insert
7. Transformation (형질전환)
8. Cloning Vector
본문내용
1.DNA는 4 개의 염기로 구성되어 있음
Purine: Adenine, Guanine
Pyrimidine: Thymine, Cytosine
3.Restriction enzyme (endonuclease)
1960년대 후기에 Stewart Linn과 Werner Arber에 의해 발견.
DNA의 특정 부분에 붙어 양 쪽 가닥의 backbone을 자른다. (박테리아의 phage로부터 감염에 대한 방어체계)
Restriction endonucleases는 DNA fragment를 만들기 위한 핵심 요소이다.
Palindromic sequence: 거울상으로 앞뒤가 동일한 sequence
Two fold symmetry, Rotational symmetry
Cleavage of DNA by the restriction enzyme EcoR1 Sticky ends가 생성됨
제한효소는 각각의 효소별 특정 인식 서열을 가지고 있기 때문에 각 효소별 특정 DNA의 부위를 자른다.
Cleavage site에 따라 제한 효소의 type이 결정된다
Type 1: Recognition sequence로부터 1,000개 이상의 base pair를 자른다.
Type 2: Recognition sequence의 중간 부분을 자르며 genetic engineering에 유용하다.
4.Restriction-Modification (R-M) system
박테리아는 phage의 메틸화 되지 않은 DNA만 자르고 자신의 메틸화 된 DNA는 자르지 않음.
박테리아 DNA의 메틸화는 modification enzyme (Methylase)에 의해 진행됨. 이는 Restriction enzyme이 인식하는 부위에 해당하는 서열을 인식해 DNA를 메틸화 시킨다. 이를 통해 박테리아는 자신의 DNA를 공격하지 않는 제한효소를 만들 수 있게 된다.
참고 자료
없음