[화학과 분석화학 실험] Determination of Caffeine in HPLC HPLC 의한 정량분석

소개글

1.실험 목적 : HPLC를 이용하여 커피, 아스피린, 홍차, 콜라 등에 들어 있는 caffeine의 농도를 알아본다.

2.실험 이론 : HPLC는 일반적으로 500~5000psi의 압력으로 일정하게 이동성 용매 를 흘려주는 pump를 사용한다. 중력 액체 chromatography법에서 HPLC의 가장 명백한 이점은 시료가 더욱 신속하게 분리된다는 점이다. 또 휘발성이거나 기체 chromatography법에서 열적 분해가 일어나는 시료를 신속하게 일괄적으로 분리시 킬 수 있다는 점이다.
HPLC는 고정상을 매우 작은 알갱이를 사용하기 때문에 예리한 peak를 얻는다.
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목차

1.실험 목적
2.실험 이론
3.실험 방법
4.실험 결과
5.고찰

본문내용

1.실험 목적 : HPLC를 이용하여 커피, 아스피린, 홍차, 콜라 등에 들어 있는 caffeine의 농도를 알아본다.

2.실험 이론 : HPLC는 일반적으로 500~5000psi의 압력으로 일정하게 이동성 용매 를 흘려주는 pump를 사용한다. 중력 액체 chromatography법에서 HPLC의 가장 명백한 이점은 시료가 더욱 신속하게 분리된다는 점이다. 또 휘발성이거나 기체 chromatography법에서 열적 분해가 일어나는 시료를 신속하게 일괄적으로 분리시 킬 수 있다는 점이다.
HPLC는 고정상을 매우 작은 알갱이를 사용하기 때문에 예리한 peak를 얻는다.

위 식에서 A, C 항이 줄어들어 H(plate height)가 줄어들게 된다. 작은 알갱이를 사용하므로 나오는 시간이 비슷해지고, 평형을 이루는 데 시간이 조금 걸리기 때 문이다. HPLC는 GC와 마찬가지로 혼합물을 이루는 각 성분들의 분리가 관 속에 서 각 성분들의 머무름 차이, 정도에 의존한다.
- Degassing
① vaccum degassing :진공 상태에서 여과시킴으로써 여과와 degassing을 동시에 행할 수 있어 가장 많이 사용한다.
② Helium sparaging : Inert gas인 Helium을 solvent에 주입함으로써 air, oxygen, bubble를 제거시킨다.
- Buffer 용액의 사용 목적
① 이온성 시료 성분의 분석시 pH 조절에 의해 이온 억제 및 이온쌍 형성을 이루 어 retention time을 증가시킨다.

참고 자료

없음