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[공학기술]Gram Staining-미생물 염색법

*연*
최초 등록일
2007.06.18
최종 저작일
2003.03
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소개글

Gram Staining에 관한 실험과 내용정리

목차

1. Title
2. Date:
3. Name:
4. introduction
5. Materials
6. Method
7. Result
8. Discussion
9. Reference
10. Pre-report
** 참고문헌 **

본문내용

미생물의 염색법 중 가장 기본이 되는 Gram Staining은 미생물의 동정에서 중요하다. 그 이유는 염색된 미생물의 색을 관찰하거나, 모양 등 아주 간단한 방법으로도 미생물을 분류/동정 할 수 있어 널리 손쉽게 이용되기 때문이다.
5. Materials
알코올램프, needle/loop, PBS, crystal violet, Iodine, Safranin O, micropipette, Acetone: Ethanol=1:1, washing 할 water
6. Method
① PBS를 깨끗이 세척하여 건조한 슬라이드 글라스에 떨어뜨린다
② Needle로 균을 찍어서 ①의 PBS에 잘 풀어준다
③ 열고정을 한다 (알코올램프 불꽃 위를 왔다갔다 하면서 고정해준다)
④ Crystal violet에 1분정도 staining 한 후 물로 washing 한다
⑤ Iodine(매염제)로 1분 staining 한 후 물로 washing 한다
⑥ Aceton : 95% Ethanol = 1:1 용액을 뿌려준 후 30초 후 물로 washing한다
⑦ Safranin O로 30초간 Staining 해 준 후 물로 washing 한다
⑧ 건조시킨다
⑨ 현미경으로 관찰한다
- immersion oil을 한 두 방울 뿌려주어 렌즈와 슬라이드 사이에서 볼록 렌즈 역할을 하여 더 잘 보이게 해준다

참고 자료

• Loyola University Chicago Stritch School of Medicine
http://www.meddean.luc.edu/lumen/DeptWebs/microbio/med/gram/tech.htm
• http://microvet.arizona.edu/Courses/MIC419/SystemModules/infectiousdisease.html
• http://rkm.com.au
• http://plaza4.snut.ac.kr/~snutfood/cyberstudy/sungtae/misangmul_7.html
• http://www.sejong.edu/~deokkun/mi2.htm
• 미생물학 실험서 한국미생물학회 편 (을유문화사. 1998)
• http://myhome.hanafos.com/~s9euno/ch1-2.htm

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