[생물학실험][서울대]DNA추출 및 전기영동
- 최초 등록일
- 2006.06.22
- 최종 저작일
- 2006.04
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소개글
제한효소와 DNA전기영동입니다.
A+ 받은 레폿입니다.
참고하세요.
목차
1. Introduction
2. Materials & Methods
3. Result
4. Discussion
5. Reference
본문내용
1. Materials and Methods
(1)Materials
pcDNA3.1, EcoRI, BamHI, 10X buffer, BSA, 아가로스 젤, 1.5ml 튜브, 파이펫, 팁, 증류수, water bath, 6X DNA loading dye, 1 kb size marker, 50X Tris-acetate/EDTA buffer, power supply, gel running kit, UV box, 비닐 장갑, floater 50X TAE buffer - Tris 242g, glacial acetic 57.1ml, 0.5M EDTA 100ml / 1L
(2)Methods
1. Double cut으로 pcDNA3.1 2㎕와 BamHI, EcoRI 각각 0.5㎕, 10X buffer, BSA 각각 1㎕를 합치고 D. W를 넣어서 총 10㎕가 되게 만든다.
2. Single cut으로 pcDNA3.1 2㎕와 EcoRI 0.5㎕, 10X buffer 1㎕와 D.W를 합쳐서 10㎕
를 만든다.
3. No cut으로 pcDNA3.1 2㎕와 D.W를 합쳐서 10㎕를 만들고 위에서 만든 것과 함께 37도에서 한 시간 동안 반응시킨다.
4. DNA 시료를 6X DNA loading dye와 혼합한 후 파이펫을 이용하여 gel의 홈에 혼합액
을 조심스럽게 loading한다.
7. Gel tank의 뚜껑을 닫고 일정한 voltage로 gel을 gunning한다.
8. 전기영동이 끝나면 gel을 자외선 하에서 관찰하고 촬영한다.
참고 자료
김영민 외, 생물학실험, 아카데미서적, 1993.
민철기, 일반생물학실험서, 라이프사이언스, 1998.
Purves et al., Life the science of biology-sixth edition, 교보문고, 2005.
www.google.com
http://blog.naver.com/chip_chip