대학생물학및실험2 항생제 감수성 평가(Paper disc method) 실험 레포트

소개글

동국대학교 "대학생물학및실험2 항생제 감수성 평가(Paper disc method)" 실험 레포트입니다. Disc diffusion의 개념을 이해하고, 항생제를 이용한 생장 억제 실험을 통해 clean zone을 관찰함으로써 앞서 배양한 신체 미생물의 항생제에 대한 감수성 및 항생제의 항균력을 알아보는 실험이다.

목차

1. Title
2. Date
3. Name
4. Purpose
5. Material
6. Method
7. Results
8. Discussion
9. Projects
10. Reference

본문내용

4. Purpose : Disc diffusion의 개념을 이해하고, 항생제를 이용한 생장억제 실험을 통해 clean zone을 관찰함으로써 앞서 배양한 신체 미생물의 항생제에 대한 감수성 및 항생제의 항균력을 알아본다.

5. Materials : 여러 종류의 항생제(Ampicillin 100mg/ml, P/S 1mg/ml) paper disc, 은박지, 세균, 삼각봉, 70% EtOH, 알코올 램프, LB배지, pipette, tip, autoclave, 핀셋, 자

6. Methods :
[항생제 disc 만들기]
① paper disc를 은박지로 싸서 autoclave 멸균한다.
② 은박지를 깔고 그 위에 필요한 양만큼의 멸균한 disc를 멸균한 핀셋으로 집어서 올려놓는다.
③ disc에 촉촉이 젖을 정도로 (보통 20ul) 항생제를 loading 한다.
④ 건조시킨다. (보통 10~20분)
[균의 도말]
①실험 전에 사용할 균을 LB broth에 접종한 후 37℃에서 24시간 키워 activation시킨다.
②activation 시킨 균을 200~300ul를 배지(labelled)에 접종한다.
(LB agar plate : 실험 전에 물기 제거를 위하여 37℃ incubator에서 2~3시간 정도 둔다)
③70% EtOH와 알코올램프로 삼각봉을 멸균한다.
④충분히 식힌 후 접종한 균을 골고루 도말한다.
[Disc 심기]
①멸균된 핀셋으로 아무것도 처리하지 않은 disc(control)와 항생제가 loading 된 disc를 집어 균이 도말된 plate 위에 살포시 올려놓는다.
②Disc를 심은 후 빠른 시간 내에 37℃ incubator에서 배양한다.
③24~48시간 배양 후, 자를 이용하여 clear zone (zone of inhibition)의 지름을 측정한다.

[주의사항]
-각 항생제 disc는 배지 가장자리에서 1.5cm정도 떨어지게 한 후 정해진 장소에 올려놓는다.
-paper를 심기 전에 배지의 뒷면에 어떤 위치에 어떠한 항생제 disc를 심을 것인지 표시해준다.
-Disc 간 간격은 2.4cm 이상 되게 하는 것이 좋다.

참고 자료

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