생명과학보고서_Primary Cell Culture & Sub culture(아주대 전공실험2)

목차

1. 실험목표
2. 실험원리
3. 실험 방법 및 재료
4. 실험 결과
5. 고찰
6. 참고문헌

본문내용

[1] 실험 목적
- primary cell culture의 원리를 이해하고, 쥐의 간세포를 이용해 primary cell culture를 진행해본다.
- Sub culture의 방법을 익힌다.

[2] 실험 원리
primary cell culture는 불멸화 된 세포주와는 반대로 다세포 유기체에서 갓 얻은 세포의 생체 외 배양이다. 생물체로부터 분리한 세포, 조직 및 기관을 재료로 하여 직접 배양하는 것을 말하며, 첫번째 sub culture 전 단계까지를 의미한다. 조직으로부터 가장 처음 배양된 세포를 1차 배양 세포라고 하며, 생체 내와 가장 유사한 형태를 보이고, 제한된 수명을 가지고 있다. 일반적으로 primary cell culture은 세포주보다 생체 내 조직을 더 대표하는 것으로 간주한다. 이 배양에 사용되는 세포는 조직이나 기관으로부터 떼어내거나 화학적으로 분해를 하거나 하여 얻는다. 이 세포들을 적절한 배지가 들어있는 유리 용기나 플라스틱 용기에 옮겨서 자라도록 한다. 이렇게 키우면 세포의 성장속도는 보통 낮고 이질적인 경우가 많다. 또한 바이러스나 박테리아의 의한 잠재적인 오염도 치명적인 단점이다. 그럼에도 불구하고 이 세포들은 여전히 세포주에 비해 선호되는데 그 이유는 세포주에 비해 그 조직에 있는 세포 형태들을 잘 대표하기 때문이다. 그리고 윤리적인 측면에서도 자유롭다. 1차 세포 배양에서 세포의 형태적 구조는 몇몇 유형이 있다.
① 상피(epithelium) 유형이들은 다각형 형태이고 편평하게 보인다. 그 이유는 세포들이 기판에 부착해서 연속된 얇은 층을 형성하기 때문이다.
② 에피테로이드(epitheloid) 유형이들은 둥근 외형을 가지며 상피 유형과 달리 기판에 부착하지 않고 얇은 층을 형성하지도 않는다.
③ 섬유아세포(fibroblast) 유형이들은 각이 져 있고 길쭉한 형태로 단단하게 패킹된 세포가 아니라 그물망처럼 네트워크를 형성하고 있다.

참고 자료

강신성 외 11인 역. (2017). Vander’s 인체생리학 제14판. ㈜라이프사이언스. pp.164-169
Gagnieur, L., Cheval, J., Gratigny, M., Hébert, C., Muth, E., Dumarest, M., & Eloit, M. (2014). Unbiased analysis by high throughput sequencing of the viral diversity in fetal bovine serum and trypsin used in cell culture. Biologicals, 42(3), pp.145-152.
네이버 지식백과(생명과학대사전). 1차배양. 2014. https://terms.naver.com/
네이버 지식백과(분자생물학사전). 조직배양. 2020. https://terms.naver.com/
네이버 지식백과(두산백과). 불멸화세포, 계대배양, EDTA. 2020. https://terms.naver.com/
네이버 지식백과(화학대사전). 페놀레드. 2001. https://terms.naver.com/
네이버 지식백과(건강백과). 간.2020. https://terms.naver.com/
Wikipedia. Primary cell culture. 2020. https://en.wikipedia.org/
BRIC(생물학연구정보센터). Serum-free media 2006. www.ibric.org/
조수현. 천연식물추출물(RIP)이 쥐의 간섬유화 치료에 미치는 영향. The Journal of Korean Biological Nursing Science Vol.8, No.2, December 2006, pp. 41-59.