BRADFORD 단백질 정량법을 이용한 온도변화에 따른 유청단백질의 농도 측정(추가실험)

소개글

화공생물공학단위조작실험 1 단백질 정량법(BCA, Bradford) 추가 실험 자료입니다

목차

1. 실험 목적
2. 실험 이론
3. 실험 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 고찰
7. 결론
8. 참고문헌

본문내용

<실험 목적>
- 단백질 정량법을 실생활에서 쉽게 접할 수 있는 단백질 식품에 이용하고자 하였다.
- 프로틴 파우더 단백질을 분석함에 있어 어떠한 정량법이 적절한지 판단해보고자 하였다.
- 각 온도에 따른 프로틴 파우더의 단백질 변성 정도를 파악해보고자 하였다.
- 단백질과 쿠마시블루 염색약의 결합으로 흡광도를 측정하는 Bradford 정량법의 원리를 이해하고자 하였다.
- 프로틴 파우더에 열을 가했을 때, 단백질 변성이 일어나 체내 흡수량에 영향을 주는지에 대해 알아보기 위해 단백질 정량법 중 하나인 Bradford 정량법을 이용하여 온도에 따른 프로틴 파우더의 단백질 변성을 확인하고자 하였다.

<실험 이론>
- Bradford 단백질 정량법: 쿠마시블루와 단백질의 특정 아미노산의 결합력을 이용하여 정량하는 방법이다.
- 원리: 쿠마시블루 G-250 염색약이 산성 환경에서 단백질(염기성 및 방향족 곁 사슬을 갖 는 아미노산)과 결합 -> 쿠마시블루가 붉은색(단백질과 결합하지 않은 양이온 형태) -> 푸른색(단백질과 결합하여 음이온형태를 띤다.)으로 바뀐다.
- 쿠마시블루 - 단백질 복합체가 형성되는 도중, 붉은 쿠마시블루가 단백질의 이온화 가능 한 부위에 전자제공 - > 단백질 중성 상태 유지 불가- > 소수성 부위를 노출-> 노출된 단백질의 소수성 부위는 염색약과 반데르발스 힘으로 비공유결합을 이룸 -> 양전하를 띠 는 아민(amine)기는 염색약의 음전하를 띠는 부위와 가깝게 위치를 조정하여 이온결합을 이룸 (->염색약과 단백질의 결합을 더욱 강화).
- 반데르발스 힘: 전기적 상호작용이 아닌 분자간, 혹은 한 분자 내의 부분 간의 인력이나 척력, 무극성 분자에서 전자의 운동으로 순간적인 쌍극자가 형성되면 그 옆의 분자도 일 시적인 편극이 일어나서 유발 쌍극자(또는 유도 쌍극자)가 생성된다. 이런 순간적인 쌍극 자와 유발 쌍극자의 인력이다.

참고 자료

BRADFORD 원리 [실험을 해봅시다] (9) 단백질 분석-1 > BRIC (ibric.org)
BCA, BRADFORD 차이
단백질 정량 (Protein Quantification) : 주요브랜드 자세한 product information (dawinbio.com)
단백질 구조, 위키백과
https://ko.wikipedia.org/wiki/%EB%8B%A8%EB%B0%B1%EC%A7%88%EC%9D%98_%EA%B5%AC%EC%A1%B0
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+단백질 구조 자료, 분자생명공학 PPT
펩타이드결합, 위키백과
https://ko.wikipedia.org/wiki/%ED%8E%A9%ED%83%80%EC%9D%B4%EB%93%9C_%EA%B2%B0%ED%95%A9
[네이버 지식백과] 단백질 변성 [protein denaturation] (화학백과)
https://terms.naver.com/entry.naver?docId=5827495&cid=62802&categoryId=62802
http://kocw.xcache.kinxcdn.com/KOCW/document/2018/wonkwang/parkkyungmin0411/8.pdf
브레드퍼드 단백질 정량법, 위키백과, 브래드퍼드 단백질 정량법 - 위키백과, 우리 모두의 백과사전 (wikipedia.org)
반데르발스힘, 위키백과,
https://ko.wikipedia.org/wiki/%EB%B0%98%EB%8D%B0%EB%A5%B4%EB%B0%9C%EC%8A%A4_%ED%9E%98
https://ko.lambdageeks.com/protein-denaturation-temperature/?utm_content=cmp-true
http://contents.kocw.or.kr/KOCW/document/2015/shinhan/choibyungbum/7.pdf
유청단백질 https://www.ejmsb.org/archive/view_article?pid=jmsb-35-4-270#T6