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(동국대 의생명공학 / 생명공학 / 생명과학) A+ 레포트_HeLa cell에서 추출한 cell protein과 exosome protein BCA단백질 정량화를 하고 SDS-PAGE를 이용하여 exosome의 발현 단백질인 CD63 발현 정도 관찰

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최초 등록일
2022.07.15
최종 저작일
2019.09
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소개글

"(동국대 의생명공학 / 생명공학 / 생명과학) A+ 레포트_HeLa cell에서 추출한 cell protein과 exosome protein BCA단백질 정량화를 하고 SDS-PAGE를 이용하여 exosome의 발현 단백질인 CD63 발현 정도 관찰"에 대한 내용입니다.

목차

1. 제목
2. 이름
3. 실험목적
4. 실험방법
5. 결과
6. 고찰

본문내용

1. 제목 : HeLa cell에서 추출한 cell protein과 exosome protein BCA단백질 정량화를 하고 SDS-PAGE를 이용하여 exosome의 발현 단백질인 CD63 발현 정도 관찰
2. 이름 :
3. 실험목적 : HELA cell protein과 Exosome protein을 Western blot하여, 각각에서 CD63의 존재 유무와 양을 확인한다.
4. 실험방법
① Cell thawing
1) Media를 37°C로 데우고 15ml conical tube에 9.5ml 넣는다.
2) 액체 질소 탱크에서 cell stock을 꺼내어 water bath에 넣어 빠르게(1~2분) 해동한다.
3) Cell stock 용액 500ul를 Media 9.5ml가 담긴 tube에 넣는다.
4) 1300rpm, 3분, 25°C, centrifuge
5) 상층액만 제거한 뒤 Pellet에 media 1ml를 넣고 골고루 풀어준다.
6) 9ml media가 담긴 배양 용기에 8)을 500ul 넣고 cell이 골고루 퍼지도록 흔들어준다.
7) 37°C incubator에서 배양한다.
② Sampling of protein from cells
1) Media를 제거한 세포를 5ml PBS로 2번 washing한다.

참고 자료

Rahbari R, Sheahan T, Modes V, Collier P, Macfarlane C, Badge RM (2009). "A novel L1 retrotransposon marker for HeLa cell line identification". BioTechniques. 46 (4): 277–284. doi:10.2144/000113089. PMC 2696096. PMID 19450234.
Smith, B. J. (1984). "SDS Polyacrylamide Gel Electrophoresis of Proteins". Proteins. Methods in Molecular Biology. 1. pp. 41–56. doi:10.1385/0-89603-062-8:41. ISBN 0-89603-062-8. PMID 20512673.
Eisenberg, E., Levanon, E. Y. (2013) Human housekeeping genes, revisited. Trends Genet 29, 569-574.
Koonin, E. V. (2000) How many genes can make a cell: the minimal-gene-set concept. Annual Review of Genomics in Human Genetics 1, 99–116 .
Thellin, O., et al. (1999) Housekeeping genes as internal standards: use and limits. Journal of Biotechnology 75, 291–295.
Technote : Western Blot, Seoulin Bioscience, Oct.2018, https://www.seoulin.co.kr/contact-center/data/?mod=document&uid=240
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