Sub-culture& Trypan blue assay 계대배양

소개글

Sub-culture(계대배양) 후 Control/100nM taxol 처리/10nM taxol 처리한 cell에 Trypan blue assay를 진행한다.

목차

Ⅰ. Introduction
1. 실험원리

Ⅱ. Material & Method
1. 실험 재료
2. 실험 방법

Ⅲ. Result

Ⅳ. Discussion

Ⅴ. Reference

본문내용

Ⅰ. Introduction
1. 실험원리

1) 세포배양
조직으로부터 세포를 분리하여 생체와 같은 조건의 무균 배지에서 이들 세포를 유지, 배양하는 것. 같은 종류의 세포를 배양함으로써 생화학적 및 분자생물학적인 많은 정보를 얻을 수 있다.

-Primary cell culture: 생물체로부터 분리해 낸 세포, 조직 및 기관을 재료로 하여 직접 배양하는 것. 생체 내 생리활성과 거의 비슷한 양상을 보이나, 세포 노화가 생기고 분열의 한계가 있다.
-Continuous cell line: Gene editing에 의해 Primary cell culture한 세포가 불멸화된 세포. 지속적으로 분열할 수 있어 분열의 한계가 없으나 세포 노화가 일어날 수는 있다.

2) Sub-Culture(계대배양)
세포를 동물로부터 떼어내면 배양접시나 시험관에서 배양하게 된다. 배양접시에서 세포를 배양하면, 세포는 배양접시의 바닥에 한 층으로 붙어서 자라게 된다. 이 상태에서 세포들이 계속 분열하다 보면 더 이상 배양접시에 붙어 증식할 수 있는 공간이 부족하여 증식을 멈추게 된다. 이러한 세포들을 계속하여 증식하게 하려면 세포의 일부를 배양접시에서 떼어서 새로운 배양접시에 옮겨주어야 하는데, 이를 계대배양이라고 한다.

참고 자료

박상대, 분자세포생물학, 아카데미서적, 1998, p.12-13
조문구, 배양공학, 유한문화사, 2004, p.195
유정식, (1995), 세포 배양법을 이용한 화학 물질의 세포독성 측정 방법에 관한 연구, 건국대학교 대학원 석사학위논문