[생화학학 실험 A+ 보고서] Protein extraction, Protein quantification, Bradford assay, SDS-PAGE and western blotting

소개글

"[생화학학 실험 A+ 보고서] Protein extraction, Protein quantification, Bradford assay, SDS-PAGE and western blotting"에 대한 내용입니다.

목차

1. Introduction
1) Protein
2) Protein extraction
3) Protein quantification and Bradford assay
4) SDS-PAGE and western blotting

2. Result
1) Bradford assay 정량
2) SDS-PAGE and western blotting

3. Discussion

4. Reference

본문내용

1. Introduction
1.1 단백질 (Protein)
단백질이란 아미노산이 펩타이드 결합을 하여 생긴 여러 개의 아미노산으로 이루어진 고분자 화합물을 말한다. 이들은 세포를 구성하거나 생체 내 물질대사의 촉매 작용을 하여 생명 현상을 유지하는 물질로 알려져 있다. 이러한 단백질을 생체 내에서 합성하는 과정은 아래 figure 1에 나타내었다. DNA backbone을 통해 만들어진 pre-mRNA는 RNA splicing 과정을 통해 intron 서열이 제거되고 exon 부분만 연결되는 과정을 거친다. 이렇게 유전정보만을 갖고 있으며 단백질로 합성할 수 있는 RNA(A, U, G, C)로 만들어졌다면 이들은 핵공을 통해 핵을 빠져나와 cytosol까지 유전정보를 운반하고 리보솜(ribosome)에 부착되어 유전정보가 읽히게 된다. tRNA(transfer RNA)는 amino acid 단백질 구성 블록을 운반하는데, 이것은 mRNA (3개 단위, codon)와 상보적으로 결합하여 하나의 amino acid를 결정하여 amino acid chain을 형성하고 이렇게 완성된 단백질은 리보솜에서 방출되어 단백질 1~4차 구조를 이루며 단백질의 역할을 한다.

참고 자료

Nature Communications, volume 11, 4812, (2020)
https://www.thermofisher.com/kr/ko/home/life-science/protein-biology/protein-biologylearning-center/protein-biology-resource-library/pierce-protein-methods/traditional-methods
-cell-lysis.html
https://tipbiosystems.com/tbs/wp-content/uploads/2018/02/AN-LS-004-Bradford-Assay_2
017_05_29.pdf
https://www.google.com/search?q=cusabio.com,+western&sxsrf=AOaemvIudfflpZQ0gg
IWmKQ4eE2-C6I7Fg:1637909815079&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=2ahUKEwj8mc7Fu
bX0AhXXMN4KHchQBKYQ_AUoAnoECAEQBA&biw=730&bih=701&dpr=1.31#imgrc=auXvhn
vo9b4KNM
https://www.youtube.com/watch?v=Yh69yHJMWPc
https://www.youtube.com/watch?v=oaNyyXlKWwU
https://www.anton-paar.com/corp-en/services-support/document-finder/application-repor
ts/dimerization-of-bovine-serum-albumin-as-evidenced-by-particle-size-and-molecular-mass
-measurement/
https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/261/593
/a 2153pis.pdf
https://pubs.rsc.org/en/content/articlepdf/2017/cp/c6cp08809k
https://www.novusbio.com/support/loading-controls-for-western-blot
https://www.abcam.com/gapdh-antibody-6c5-loading-control-ab8245.html
https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/NP0301BOX
https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/NP0321PK2
Scientific Reports, volume 10, 22345 (2020)
https://bitesizebio.com/19799/the-top-10-western-blotting-mistakes-and-solutions/