[대학생명과학전공실험] Cell seeding, sub culture & Crystal violet assay 실험 보고서
유지우
다운로드
장바구니
목차
1. 실험의 목적2. 실험의 원리 및 이론
3. 실험과정
4. 실험결과
5. 고찰
6. 참고문헌
본문내용
1. 실험의 목적- Cell seeding과 Cell culture를 이해한다.
- Sub culture하는 과정을 하는 방법을 알아본다.
- 미생물학의 사용되는 시약인 Crystal violet assay을 사용해보고 실험한다.
2. 실험의 원리 및 이론
- Cell line
Cell line은 세포주라고 하며 적절한 신선한 배지와 공간이 주어지면 세포가 무한정으로 증식할 세포 배양물을 의미합니다. 세포 배양 및 세포주는 특정 세포의 생리학적, 병태생리학적 및 분화 과정을 연구하는데 중요한 역할을 합니다. 세포주 로부터 얻어진 형질전환 세포주 또는 암세포 한정 세포주이며, 단층 또는 현탁액 형태로 성장 될 수 있습니다. 이 세포는 12~14시간의 생성 시간으로 빠르게 분열하며 무기한 계대배양 할 가능성이 있습니다. 세포주 를 시험관 내 모델 로 유용하게 만드는 많은 이점이 있습니다. 첫째, 세포주는 균질한 세포 집단을 제공합니다. 둘째, 비교적 생육이 용이하고 허용 가능한 수의 계대를 통해 지속적으로 계대 배양하여 단기간에 많은 수의 세포를 제공할 수 있습니다. 정상세포와는 다르게 이러한 영구 세포주는 조작, 복제 및 무한정 전파할 수 있는 연속적이고 균일한 세포 소스를 제공합니다.
- Cell culture
재료와 방법은 다음과 같습니다. NIH-3T3(쥐 배아 세포, ATCC CRL-1658), HEK293T(인간 배아 신장 세포, ATCC CRL-1573), SH-SY5Y(인간 신경아세포종, ATCC CRL-2266) 및 3D4/2(포린 매크로파지)입니다. Dulbecco의 수정된 Eagle의 배지 (DMEM, HyClone, GELife Sciences, PA, 미국), 10% 태아 소 혈청 (FBS, HyClone, GE 생명 과학), PA, 미국), 100 U/mL 페니실린, 100 U/mL 스트렙토마이신, 2mM 글루타민입니다. (HyClone, GE 생명과학, PA, USA). 모든 세포 배양은 a에서 37℃로 유지되었습니다.
참고 자료
A.B. Ulrich, P.M. Pour, Encyclopedia of Genetics 2001, Academic Press, p. 310-311G.Cooper, 「The cell: A Molecular Approach (8th Edition) 」, Oxford Univ Press, 2019
위키피디아, “cryopreservation” https://en.wikipedia.org/wiki/Cryopreservation,2021.09.13
Thermo Fisher “clean Bench”, https://www.thermofisher.com/kr/ko/home/lifescience/lab-equipment/biological-safety-cabinets-clean-benches/cleanbenches.html 2021.09.13
Fisherscientific, “CO2 incubators”,
https://www.fishersci.com/us/en/browse/90088090/CO2-Incubators, 2021.09.13
Madigan, Martinko, Bender, Buckley, Stahl.「BROCK의 미생물학 14판」, 바이오사이언스출판, 2016, p.105-106
위키피디아, ”HEK 293 cells”, https://en.wikipedia.org/wiki/HEK_293_cells 2021.09.13
위키피디아, “239T”, https://ko.wikipedia.org/wiki/293T, 2021.09.13
Cell Image Lab, “cell seeding, https://www.healthcare.nikon.com/en/ss/cell-imagelab/glossary/seed.html ,2021.09.13
위키피디아, “cytotoxicity”,https://en.wikipedia.org/wiki/Cytotoxicity, 2021.09.13
NCBI, “Cytotoxicity Aassys” https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK540958/,2021.09.13
G-BIOSCIENCES, “cell cytotoxixity”,
https://info.gbiosciences.com/blog/bid/164400/what-is-cell-cytotoxicity-and-howto-measure-it, 2021.09.13
NCBI, “Cell Viability", https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6716531/,2021.09.13
Cell Signaling, “cell proliferation,”https://www.cellsignal.com/science-
resources/cell-viability-and-survival, 2019.09.13
Science Direct, “colorimertry, theory”
https://www.sciencedirect.com/topics/nursing-and-health-professions/colorimetry,2021.09.13
Pubmed, “A simple fluorometric assay for the determination of cell
numbers” ”https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8046258/, 2021.09.13
Pubmed, “A simple fluorometric assay for the determination of cell
numbers” ”https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8046258/, 2021.09.13
Abcam, “Crystal violet Assay”, https://www.abcam.com/crystal-violet-assay-kitcell-viability-ab232855.html, 2021.09.13
ScienceDirect, “DPPH Assay”, https://www.sciencedirect.com/topics/foodscience/dpph-assay, 2021.09.13
https://en.wikipedia.org/wiki/MTT_assay )
충북지역암센터,”암이해”, https://www.cbnuh.or.kr/cbrcc/sub05/sub05_01_03_c.jsp, 2021.09.13
산림청, “택솔”,
https://www.forest.go.kr/newkfsweb/kfi/kfs/mwd/selectMtstWordDictionary.do?wrdSn=9586&mn=KFS_02_05_06_02 2021.09.13