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온도와 IPTG의 농도를 달리하여 어떤 조건에서 단백질발현이 가장 잘되는지 보기위해 protein induction test

용숙
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최초 등록일
2021.10.21
최종 저작일
2021.09
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소개글

"온도와 IPTG의 농도를 달리하여 어떤 조건에서 단백질발현이 가장 잘되는지 보기위해 protein induction test"에 대한 내용입니다.

목차

(1) Abstract
(2) Purpose
(3) Introduction
(4) Materials& Methods
(5) Results
(6) Discussion
(7) References

본문내용

(1) Abstract
단백질 발현에 큰 변수로 작용하는 두가지인 온도와 IPTG의 농도를 달리하여 어떤 조건에서 단백질발현이 가장 잘되는지 보기위해 protein induction test를 하고 SDS PAGE를 하여 단백질을 분리하여 확인한다.
(2) Purpose
단백질 발현에 큰 변수로 작용하는 두가지인 온도와 IPTG의 농도를 달리하여 어떤 조건에서 단백질발현이 가장 잘되는지 보기위해 protein induction test를 한다.
(3) Introduction
단백질 발현의 변수로는 온도와 IPTG농도가 있다. 세균은 37C에서 잘 자란다. 하지만 무조건 이것이 좋은 것은 아니다. 만약 E.coli가 37C에서 자라면 조건이 너무 좋아 단백질을 마구 빨리 만든다. 많이 만드는 것이 좋은게 아니라 제대로 된 것이어야 한다. 급하게 만드니까 3차 구조가 잘 안 생길 수 있다. 이런 구조이상은 수용액에서 침전물로 가버린다. 즉, 변성된다는 것이다. IPTG는 보통 vector를 이용한 재조합 단백질의 발현에 사용된다. 박테리아는 단백질 발현보다는 증식을 주로 하는 생명현상을 보인다. 그러나 Induction 처리를 하게 되면 박테리아는 증식을 줄이고 단백질 발현을 주로 하게 된다.

참고 자료

https://ko.wikipedia.org/wiki/IPTG (IPTG의 원리)
https://en.wikipedia.org/wiki/T7_RNA_polymerase (T7 RNA polymerase 기능)
https://terms.naver.com/entry.naver?docId=5144765&cid=61232&categoryId=61232 (Lac operon이란)
https://terms.naver.com/entry.naver?docId=5929934&cid=61233&categoryId=61233 (lac repressor이란)
https://ko.m.wikipedia.org/wiki/GST_%ED%83%9C%EA%B7%B8 (GST란 무엇인가)
https://en.wikipedia.org/wiki/SDS-PAGE (SDS-PAGE란)

유주현.변유량, 응용 미생물학실험, 도서출판 효일, p.191-p.192. (polyacrylamide gel 전기영동이란)
유주현.변유량, 응용 미생물학실험, 도서출판 효일, p.232-p.235 (polyacrylamide gel 전기영동이란)
권오헌. 이귀녕, 전기영동원리 및 영동 patten해석, 도서출판 의학문화사, p.18. (SDS polyacrylamide gel이란)
윤경식.김호식, 레닌저 생화학 제 7판 상, 월드사이언스, 2018, P.93~P.95. (polyacrylamide gel 전기영동이란)
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