단백질 정량법(PCR and eletrophoresis) 예비보고서

목차

Ⅰ. 실험목적

Ⅱ. 실험 원리
1. 단백질 정량
2. 단백질 정량 종류

Ⅲ. 시약 및 기구

Ⅳ. 실험방법

본문내용

Ⅰ. 실험목적
- 단백질 정량의 목적을 알고 다양한 정량법의 원리를 이해한다.
- Bradford assay에 의하여 표준 곡선을 작성하고 미지 시료의 단백질 농도를 추정할 수 있다.

Ⅱ. 실험 원리
1. 단백질 정량
시료 내에 포함된 단백질의 양 또는 농도를 구하는 과정으로, 단백질 정제, 전기영동, 효소 활성 측정을 포함하는 모든 단백질 연구의 기본이 되는 실험이다. 특히 효소의 활성 반응 역학(kinetics)을 연구하거나, 다양한 조건에서 대상 시료의 단백질 발현량을 비교할 때 필수적이다. 생물학 분야의 경우 다른 분야보다 결과를 볼 때까지 실험의 오류를 찾아 내는 것이 어렵기 때문에 준비 단계에서의 단백질 정량이 잘못 이루어지면 잘못된 결과를 얻기가 쉽다. 그러므로 단백질 정량을 정확하게 하는 것이 매우 중요하다. 게다가 단백질은 화학적 및 물리적 성질들은 서로 다른 경우가 많아 정제 및 정량을 하는데, 공통으로 사용할 수 있는 한 가지 방법이 없다.
즉, 단백질을 정량하기 위해서는 단백질의 종류, 시료에 함유되어 있는 다른 성분들의 특성, 정량분석의 신속도 및 정밀도 등에 따라서 적당한 방법을 선택하여 사용하여야 한다.
단백질 정량은 정확성과 간편성이 중요하기 때문에 실험에 따라서 다양한 단백질 정량법이 사용되고 있다. 또한, 정확성뿐만 아니라, 대부분의 실험에서 반복적으로 사용하게 되므로, 간편성 역시 중요하게 여겨지기 때문에, 실험에 따라서 다양한 단백질 정량 방법이 사용되고 있다.
단백질 정량은 크게 두 가지로 나눌 수 있는데 비색정량적(Colorimetric) 방법과 전기영동 (Electrophoresis) 방법이 있다. 우리가 할 실험인 Bradford assay는 비색 정량법으로, 비색 정량법이란 어떤 빛이 착색 용액을 통과할 때 특정 범위 파장의 빛이 다른 파장의 빛보다 많이 흡수되는 성질을 이용한다.

참고 자료

없음