LB배지를 이용한 배양_Liquid culture & Expression_예비레포트 [A+]

목차

1. 실험목적
2. 바탕이론
3. 기구 및 시약
4. 실험방법
5. 참고문헌

본문내용

1. 실험 목적
- 액체 배지를 통해 유전자 조작된 균을 배양하고, 단백질 발현을 위한 조건을 알아본다.

2. 바탕 이론
(1) 배양과 배지
- 배양은 미생물이나 동물 또는 식물세포 등을 적당한 배식에 식균해 산소나 온도 등 적당 조건에서 증식시키는 일련의 과정이다. 배양의 형식으로는 액체배양과 고체배양 2가지가 있다. 배양 조건으로는 온도, 습도, 빛과 기체상의 조성 (산소, 이산화탄소의 분압 등) 등이 중요하며, 그 외 배양되는 생물체에 가장 중요하며 직접적 영향을 주는 것은 바로 배지이다. 배지는 다른 말로 배양기라고도 하고, 그 생물체의 직접적인 환경이며 생물체의 생존과 증식에 필요한 여러가지 영양소의 공급장이라고 할 수 있다. 배지가 액체인 경우를 액체배지라 하며, 이 액체배지에 한천(Agarose)나 젤라틴을 가해 단단하게 만든 것을 고형배지(고체배지)라고 한다. 액체배지를 쓰는 경우에 배지를 교반해 이 액체 속에 생물체를 현탁시키면서 배양하는 것을 액중배양이라 한다.
또한 배양은 배양하는 세포의 성질에 따라 종류가 나뉜다. 먼저 접착 배양계 세포는 배양용기에 붙어서 증식하는 세포이며, 부유 배양계 세포는 배지 안에 떠있는 상태로 증식하는 세포이다. 이러한 배양의 조건으로 목적하는 생물체의 생존이나 성장을 방해하는 잡균들의 번식을 막는 것도 중요하며, 멸균으로 조작하는 것 외에 항생물질을 비롯한 각종 약품을 사용할 수 있다.
배지를 포함한 배양법 전체가 개량된 후에는 더 많은 배양이 가능해져 생물학이나 의학, 농학 등에 다양하게 공헌을 하고 있다. 이러한 배양을 화학공학적으로 체계화한 것이 바로 발효공학이다.

(2) 흡광도 (OD, Optical Density=Absorbance)
- 흡광도는 광학밀도라고도 하며, 용액이 빛을 흡수하는 정도이다.
기호로는 A로 표시할 수 있는 흡광도는 이는 어떤 물질에 빛을 쪼였을 때 전체 복사량 에 대한 투과량 의 비율로 표현되며, 즉 투과율의 음의 상용로그 값으로 정의된다.

참고 자료

Charles N. Satterfield, Heterogeneous Catalysis in Industrial Practice,” 2nd ed., McGraw-Hill, Inc. (1993).
W Mantele, E Deniz, UV-VIS absorption spectroscopy: Lambert-Beer reloaded, Elsevier, 173 (2017), 965-968
Reece 외 3명, ‘생명과학 개념과 현상의 이해, PEARSONEDUCATIONKOREA, (2011).