DPPH assay- 대학생물학 실험 레포트

소개글

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목차

1. Title

2. Purpose

3. Materials

4. Methods

5. Principle

6. Projects
① 항산화 물질이 세포에 어떤 영향을 주는지 알아보세요.
② spectrophotometer의 작동 원리와 쓰임에 대해 알아보세요.

본문내용

4. Purpose : 각 시료의 항산화 능력을 테스트하고 spectrophotometer의 원리를 이해하고data를 분석한다.

5. Materials : DPPH, antioxidant, pipet

6. Methods
① 항산화 물질로 추정되는 시료와 DPPH용액을 1:1로 반응시킨다.
② 5분 incubation(in the dark).
③ spectrophotometer를 이용하여 517nm에서 OD값을 구한다.
④ 각 값을 비교 분석하여 시료의 항산화 능력을 측정한다.

7. Principle :

1)project를 통해 비타민 C가 항산화제에 해당한다는 사실을 알 수 있다. 일반적인 포도, 오렌지, 토마토의 100g에 포함된 비타민 C의 양은 각각 8mg, 45mg, 11mg 정도임을 알 수 있고, 이들의 비타민 C 함유량은 이번 실험에서 볼 수 있는 항산화 능력의 추세와 비슷하다는 것을 알 수 있다. 결과에 의하면 토마토, 오렌지, 포도 순으로 항산화 능력이 높았고, 비타민 C함유량 역시 해당 순서대로 많은 양을 함유하고 있다. 그러나, 토마토와의 다른 sample과의 비타민 C 함유량 차이가 많은 반면 실험결과에서는 상대적으로 큰 차이를 보이진 않았음을 확인 할 수 있다. 이를 전제로 비타민 C 외의 성분도 함께 항산화 능력에 관여했으며, 비타민 C가 주요한 항산화제로 작용하지 않음을 알 수 있다.

실험에서 사용한 시료인 DPPH는 free radical을 갖는 물질이며, 실제 인체 내의 활성 산소로는 실험하지 못하기에 DPPH로 대체하여 실험을 진행한 것으로 보인다. 이번 실험에서 DPPH를 사용함으로써 각 Sample의 항산화 능력에 대하여 흡광도의 차이를 확인하는데 용이해졌음을 알 수 있다. 2)Ethanol의 경우에도 역시 활성산소 종인 하이드록시기(-OH)를 갖고 있다는 것을 알 수 있고, 이들 간의 차이로 하여금 항산화 능력을 측정하는 원리였음을 이해 할 수 있다.

참고 자료

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에탄올의 성질
에탄올 제조기술 및 활용 / 김종호 / P.57~59 / 전남대학교출판부 / 2008
광산화, 광산화에 따른 활성 산소의 형성
화학용어사전 / 화학용어사전편찬회 / P.107 / 일진사 / 2017
산소 중심의 자유 라디칼의 영향 및 기능의 저하
노화의 생물학 / 장원구 / p. 105~107 / 월드 사이언스 / 2017
흡광도법 원리, 분광광도계 사용 (사진 발췌 포함)
식품분석 / 이근보 외 2인 / p. 337~345 / 유한 문화사 / 2002