화공기초실험1, HPLC 예비

목차

1. 실험목적

2. 실험이론
1) 크로마토그래피
2) HPLC
3) 이동상과 고정상
4) 크로마토그램 (용리 곡선)
5) 분리 메커니즘에 따른 HPLC의 분류
6) 이동상에 따른 HPLC의 분류
7) 컬럼효율(Column Efficiency)
8) 분리도(R, Resolution)
선택성, 분리인자 (Separation or Selectivity factor, α)
10) 용량인자, 머무름인자
11) 정성, 정량 분석

3. 실험방법

4. 실험 시 유의 사항

5. Reference

본문내용

1. 실험 목적
- HPLC의 이론 및 기기조작을 통하여 혼합 액상의 성분을 분석하고 크로마토그래피의 원리를통해 시료의 정량, 정성 분석 방법을 익힌다.

2. 실험 이론
1) 크로마토그래피
화합물을 분리하는 방법에는 재결정, 추출, 증류 등 여러가지의 방법들이 있다. 그 중 한 가지 기법이 바로 크로마토그래피이다. 크로마토그래피는 색을 의미하는 ‘크로마(chroma)’와 쓰다를 의미하는 ‘크래피(graphein)’을 합친 말로써 ‘색깔로 나타낸다’라는 의미를 가지고 있다. 이 기법은 비슷한 성질의 물질들로 이루어진 화합물을 분리하는 기법 중 가장 중요하다고 할 수 있으며 가장 널리 쓰이고 있다.
1903년 이후, Michael S. Tswett에 의해 크로마토그래피가 등장하게 되었다. 그는 식물의 색소에 대한 주제로 연구를 하는데 이 연구를 위해서는 식물의 잎으로부터 색소를 추출하여야했다. Tswett는 식물의 색소를 추출하면서 색소가 식물의 잎에 있을 때와 잎과 분리되어 순수한 형태로 있을 때 용매에 녹는 특징이 다름을 발견하였다. 잎으로부터 분리하지 않은 엽록체(chlorophyll)와 카로티노이드(carotinoid)는 ethanol에 의해 추출될 수 있었던 반면 petroleum ether을 가해줄 경우에는 엽록체는 추출이 되지 않았다. 하지만 엽록체와 카로티노이드를 잎으로부터 분리하여 순수한 형태로 있게 할 경우에는 ethanol과 petroleum ether에 의해 모두 추출이 가능하였다. 이러한 현상을 통해 Tswett는 적절한 흡착체와 용매를 이용하면 색소를 분리하고 관찰할 수 있음을 입증하였다. 이 발명이 바로 크로마토그래피이다.
크로마토그래피는 이동상과 고정상에 대한 물질의 친화도를 기반으로 하여 화합물을 분리한다. 화합물을 구성하는 각 물질들은 고정상 사이의 분배, 흡착, 이온교환 등 모두 다르게 이루어진다.

참고 자료

HPLC 실험 매뉴얼
분석화학, 이송주, 김준태, 채희남, 자유아카데미, 1999
환경분석을 위한 기기분석, 박기학, 동화기술, 2000
최신분석화학, 이준우, 신광문화사, 1999