분자유전학실험레포트(A+) Enhanced thermotolerance in E. coli expressing carrot Hsp17.7. Hsp17.7유무에 따른 E. coli 의 증식속도 비교. Hsp17.7의 고온 내성기작, IPTG 처리 이유.

목차

Ⅰ. Abstract

Ⅱ. Introduction
1. 열충격 단백질 (Heat shock protein)
2. Molecular chaperone

Ⅲ. Materials

Ⅳ. Chemical reagent & Apparatus

Ⅴ. Methods

Ⅵ. Results

Ⅶ. Discussion

Ⅷ. Reference

본문내용

Ⅰ. Abstract
본 실험은 heat shock 하에서 Hsp17.7유무에 따른 Escherichia coli의 증식속도를 비교할 목적으로 진행한다. Hsp17.7과 ligation한 pET11a를 삽입한 E.coli를 45℃에서 0분, 30분, 60분간 heat shock하여 ampicillin agar 배지에 도말, 배양하였으며, ligation하지 않은 pET11a를 삽입한 E.coli를 대조군으로 하였다. 실험결과 0분에서 대조군은 573개, 실험군은 147개의 colony가 나타났으며 30분, 60분 heat shock결과 0분의 colony수와 대비하여, 대조군은 각각 81.68%, 73.47%의 colony가 나타났고 실험군은 각각 75.51%, 38.10%의 colony가 나타났다. heat shock의 시간이 길어질수록 E.coli의 증식이 억제되며, Hsp17.7를 합성하는데 사용되는 에너지가 E.coli의 증식속도에 영향을 미치는 것으로 보인다. 전체적인 결과 실험군이 대조군에 비해 heat shock하에서 E.coli의 증식속도가 크게 감소하는 것으로 나타나며 이 결과는 Hsp17.7의 합성을 고려하더라도 실험적 오류가 발생한 것으로 보인다. Hsp17.7이 없는 대조군도 60분간의 heat shock에서 colony를 생성하므로 E.coli는 45℃의 환경에서 어느 정도 증식이 가능한 것으로 보인다. 한 번의 실험을 통해 plate 배양을 통한 colony수로 유전자 기작을 설명하는 것에는 어려움이 있어 보인다.

참고 자료

http://www.antimicrobe.org/b104.asp 대장균(작용기작)
http://brig.sourceforge.net/brig-in-action/ 대장균 유전자 지도
Interaction of Bacteriophage λ with Its E. coli Receptor LamB, Viruses 2012, 4,
3162-3178 lamB 작용
http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=432349&cid=42411&categoryId=42411
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