[생명공학실험 예비레포트]Real Time PCR

소개글

"[생명공학실험 예비레포트]Real Time PCR"에 대한 내용입니다.

목차

1. 실험 제목

2. 실험 목적

3. 실험 이론
1) PCR(Polymerase Chain Reaction)

4. 기구 및 시약
1) 기구
2) 시약
3) 사전 준비

5. 실험 방법
1) RT-PCR 준비
2) RT-PCR 시작

6. 참고 사항
1) PCR의 원리

본문내용

3) 실험 목적
- 원래의 PCR이 가지고 있는 적은 양의 핵산 물질을 신속하며 특이성있게 증폭해 내는 장점과 정확한 정량기능을 결합한 realtime PCR은 단순히 반복되는 많은 과정을 자동화하고 모든 개연된 오차를 줄여 정확하고 신속한 결과를 얻는데 편리하게 사용된다.

4) 실험 이론
∎ PCR(Polymerase Chain Reaction)
- DNA합성효소(DNA polymerase)가 DNA합성에 시발체를 필요로 하는데, 이 시발체에서 5′→3′방향으로 DNA가 합성하는 것을 이용하여, ① DNA의 외가닥에의 변성 → ② 시발체의 결합 → ③ 중합효소에 의한 상보성DNA의 합성 → ① 변성 → ② 시발체 결합···이라는 회로를 반복하는 것으로서 목적인 유전자 영역만을 시험관 내에서 증식 시킨다. 중합효소 연쇄반응의 변형 방법으로는, RNA를 대상으로 역전사효소를 이용하여 역전사 반응을 시행하여 complementary DNA를 합성하여 이를 주형으로 이용하여 중합효소 연쇄반응을 시행하는 역전사 중합 효소 연쇄 반응(reverse transcriptase polymerase chain reaction, RT-PCR)과 형광물질을 사용하여 DNA를 증폭시키면서 증폭 산물을 동시에 검출하는 실시간 중합효소 연쇄반응 등이 있다.

<중 략>

6) 실험 방법
1. RT-PCR 준비
① Total volume이 20uL가 되도록 순서에 따라 시약들을 RT-PCR tube에 넣어 준다.
syber green dye 1uL
forward primer 1uL
reverse primer 1uL
template DNA(150ng기준) x uL
D.I. water y uL
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total 20uL

참고 자료

없음