형질전환(Transformation), 유전자 정제, 전기영동(gel electrophoresis) 실험 레포트

소개글

"형질전환(Transformation), 유전자 정제, 전기영동(gel electrophoresis) 실험 레포트"에 대한 내용입니다.

목차

Ⅰ. Abstract

Ⅱ. Introduction

Ⅲ. Materials & Methods
1. Materials
2. Methods

Ⅳ. Results

Ⅴ. Discussion

본문내용

Ⅰ. Abstract

실험 목적은 외부 DNA의 bacteria plasmid로의 transformation, transformation이 된 bacteria에서의 plasmid isolation, 그리고 electrophoresis를 통한 plasmid의 확인이다.
실험목적에 부가적으로 plasmid의 conformation, bacteria간 plasmid self replication의 정도차이 등을 볼 수 있었다. Plasmid isolation – electrophoresis에서는 네종류의 외부DNA-transformation-bacteria를 사용했으며, electrophoresis결과, plasmid가 올바른 band형태로 검출되어 isolation에 성공하였다.

Ⅱ. Introduction

DNA 전기영동법의 원리는 protein electrophoresis에서와 비슷하여, voltage를 걸어주어 DNA길이에 따라 shifting되는 현상이다. DNA의 phosphorus side chain이 – charge를 가짐을 이용하게 된다. 이때 분자량이 클수록 gel matrix를 통과하는 속도가 느려진다. 또한 분자량이 같더라도 구조가 다르면 이동속도가 달라진다. 예를 들면 supercoil된 DNA는 선형 DNA보다 빠르게 움직이게 된다.
EtBr(ethidium bromide)은 DNA 사이사이에 끼어 들어가 DNA를 X선으로 감광시켰을 때 검출되도록 하는 시약이다.

형질 전환이란 외부 DNA를 숙주세포 내에 넣어주어 세포가 원래의 성질과는 다른 새로운 유전형질을 추가로 얻게 되는 것을 말한다. E.coli의 형질전환은 초기에는 발견이 되지 않았으나 박테리아를 찬 CaCl2로 처리한 다음 잠시 열처리를 하면 박테리오파지가 세포로 들어가 파지를 형성한다는 사실에 의해 처음 관찰되었다.

참고 자료

http://en.wikipedia.org/wiki/Plasmid
http://www.addgene.org/mol_bio_reference/plasmid_background/
http://en.wikipedia.org/wiki/Transformation_(genetics)