유전공학의 이해 3판 6장 정리 <재조합 DNA>

소개글

"유전공학의 이해 6장 정리"에 대한 내용입니다.

목차

6.1 재조합 DNA
6.2 유전자의 대장균 내 도입 방법
6.3 형질전환된 세포의 선발

본문내용

6.1 재조합 DNA
형질전환 – 재조합 DNA(recombinant DNA) 를 다른 세포에 도입, 발현시키는 과정
클로닝(cloning) – DNA 를 재조합하고 이를 다시 숙주세포로 도입하여 특정 유전자를 다량 획득하는 과정, 즉 증폭과 정제를 일컫는 말.

제한효소에 의한 재조합 DNA 분자의 제작
- 재조합 DNA 분자 제작의 가장 일반적이며 전형적인 방법은 제한 효소와 DNA 라이게이즈를 이용하여 제작하는 방법이다.
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1. 플라스미드 벡터를 이용한 재조합 DNA 분자의 제작
- 특정 제한효소로 잘려진 플라스미드 벡터를 원하는 DNA 분자와 DNA 라이게이즈로 연결시키면 여러 다른 재조합 벡터가 생성된다. 이 중 특정 재조합 벡터만을 박테리아 세포로 도입할 수 없기 때문에, 숙주세포로 형질전환을 통해 세포내로 도입한 후 원하는 재조합 DNA 를 함유하고 있는 숙주세포를 선발하여 필요한 DNA를 다량 획득한다.

- 벡터끼리의 자가 연결을 방지하기 위해서는 송아지 장 염기성 탈인산화효소 (calf intestine phosphatase, CIP)와 같은 효소를 이용하여 제한효소로 절단된 벡터 DNA의 한쪽 말단으로부터 5’ 인산기를 제거한다.

참고 자료

없음