Alpha7 Nicotinic Acetylcholine Receptor

소개글

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목차

1. Introduction

2. Materials and methods
1) Materials
2) methods

3. Results

4. Discussion

5. References

본문내용

1. Introduction
Transfromation
Transformation(형질전환)이란 외부 DNA를 bacteria 세포 내에 주입하여 세포가 원래의 성질과는 다른 유전 형질을 추가로 얻게 되는 것이다
prokaryote와 eukaryote에서는 DNA를 세포 내로 주입할 때 다음과 같이 조금 다른 용어를 사용한다. Transformation에서는 prokaryote인 E coli를 사용하므로 ‘transformation’이다.

(fig 1. 세포주와 DNA에 따른 용어)

competent cell
competent cell이란 정상적인 bacteria에 화학적 처리를 하여 DNA가 잘 들어갈 수 있게 만든 세포를 의미한다. ligation을 마친 DNA나, ciruclar 형태의 Plasmid를 증폭하거나 cloning을 끝내고 완성된 vector의 expression 하는 등의 용도로 이용된다. 일반적으로 대부분의 미생물은 자연상태에서 형질전환이 이뤄지지 않기 때문에, 인위적으로 외부의 DNA를 받아 들일수 있도록 물리적 화학적 형태의 처리를 통해 형질전환이 가능한 세포로 만들어 주어야 한다. 이때 형질 전환이 가능한 상태로 만든 세포를 competent cell 이라한다.
Calcium Chloride, Manganase Chloride. Hexamminecobalt Chloride, Dimethyl Sulfoxide (DMSO)의 시약을 이용하여 화학처리를 하나 이중 가장 중요한 것은 calcium chloride이다.
아래 그림과 같은 경우 CaCl2로 처리하여 competent cell을 만든후 Heat shock transformation을 하는 과정이다

(Figure 2. The binding and uptake of DNA by a competent bacteria)

transformation method
실험실에서 많이 사용하는 transformation 방법에는 크게 2가지가 있다. Heat shock transformation과 전기천공법(Electroportion) 있다.

참고 자료

https://blog.naver.com/withcoffee67/70160635571
https://blog.naver.com/sanigen/221899040443)
https://blog.naver.com/ekgp1chs/221519024992
https://blog.naver.com/hafs_snu/221108898928
https://blog.naver.com/jsmphm/150044830641