SDS-PAGE , cell lysis, buffer관련 레포트 (A+자료)
- 최초 등록일
- 2020.07.08
- 최종 저작일
- 2019.06
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목차
1. SDS-PAGE
1) 원리
2) 제조방법
3) 필요한 시약 buffer
4) 실험시 주의사항
2. Cell Lysis
본문내용
* 원리
SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate–polyacrylamide gel electrophoresis)는 polyacrylamide Gel의 변형으로 전기장에서 분자 질량에 의해 혼합물에서 하전 된 분자를 분리하기위한 분석 방법이다. sodium dodecyl sulfate(SDS) 분자를 사용하여 단백질 분자를 식별하고 분리하는 실험 기법이다.
SDS-PAGE는 단백질 분리가 가능한 전기 영동법이다. 상기 매체는 폴리 아크릴 아미드 계 불연속 겔이다. 또한 SDS(Sodium Dodecyl Sulfate)가 사용된다. 약 1.4g의 SDS는 단백질 1그램에 결합하며 2아미노산 당 하나의 SDS분자에 해당한다. SDS는 계명 활성제로 작용하여 단백질의 고유 전하를 덮어주고 매우 유사한 전하 대 질량비를 부여한다. 단백질의 고유 전하량은 SDS 로딩과 비교할 때 무시할 만하며 양전하는 분리 겔의 기본 pH 범위에서 크게 감소한다. 일정한 전기장을 가하면 단백질은 지량에 따라 각각 다른 속도로 양극쪽으로 이동한다. 이러한 절차를 통해 정확한 단백질 분리가 가능하다.
* 제조방법
겔(불연속 겔 전기 영동)에서 다른 완충제를 사용할 때 겔은 전기영동 전에 1일ᄁᆞ지 만들어 지므로 확산이 이 완충액의 혼합으로 이어지지 않는다. 겔은 유리판과 아크릴판 사이에 스페이서가 있는 두 개의 밀봉된 유리판으로 구성된 몰드에서 라디칼 중합에 의해 생성된다.
0.75mm or 1.5mm의 두께를 갖는다. 겔 용액을 붓기 위해 플레이트는 일반적으로 두 개의 스페이서가 있는 유리판의 다르게 열린 밑면을 일시적으로 밀봉하는 스탠드에 고정된다. 켈 용액의 경우
참고 자료
https://translate.google.com/translate?hl=ko&sl=en&u=https://en.wikipedia.org/wiki/SDS-PAGE&prev=search
https://translate.google.com/translate?hl=ko&sl=en&u=https://en.wikipedia.org/wiki/SDS-PAGE&prev=searchhttps://blog.naver.com/kdh090222/221664353950
https://prezi.com/rnnqxk0t3uwp/untitled-prezi/
https://translate.google.com/translate?hl=ko&sl=en&u=https://en.wikipedia.org/wiki/Sonication&prev=search