Bradford assay관련 레포트

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목차

1. 원리
2. 측정범위
3. 장단점

본문내용

1. 원리
Bradford assay는 용액의 단백질 농도를 분광기를 이용하여 측정하는 과학적 실험 기법이다. Coomassie Brilliant Blue G-250 이라는 염색약의 흡광도 차이를 이용한 실험 기법이다. 산성조건에서는 붉은 색이였던 염색약이 푸른색으로 바뀌게 되고 단백질과 결합하게 되는 원리이다. 이 Coomassie Brilliant Blue – protein complex가 형성되는 도중에 붉은 형태의 쿠마시블루가 단백질의 이온화 가능한 부위에 전자를 준다. 이는 단백질의 중성 상태를 무너뜨리게 되면서 소수성 부위를 노출시키게 한다. 노출된 단백질의 소수성 부위는 염색약과 반데르발스 힘으로 비공유결합을 이루게 되며 양전하를 띠는 Amine기는 염색약의 음전화를 띠는 부위와 가깝게 위치를 조정한다. Amine기와 염색약의 음전하를 띠는 부위간의 이온 결합(ionic bond)은 염색약과 단백질의 결합을 더욱 강화시키는 역할을 한다.

참고 자료

한남대학교 생명시스템과학과 단백질분리정제 실무, 19-20쪽, 유제근교수님
https://ko.wikipedia.org/wiki/%EB%B8%8C%EB%9E%98%EB%93%9C%ED%8D%BC%EB%93%9C_%EB%8B%A8%EB%B0%B1%EC%A7%88_%EC%A0%95%EB%9F%89%EB%B2%95