Gel Extraction, Ligation, TA cloning vector 예비보고서
- 최초 등록일
- 2020.03.07
- 최종 저작일
- 2016.03
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소개글
"Gel Extraction, Ligation, TA cloning vector 예비보고서"에 대한 내용입니다.
목차
1. 목적
2. 재료
3. 원리
본문내용
목적 : E.coli genome DNA를 아가로스 겔로부터 분리해 TA vector를 넣어 ligation시켜 재조합 DNA형성
재료 :
1) spin X
DNA가 들어있는 gel을 저온에서 얼린 후 원심분리를 하기위해 사용하는 기구로써, 원심분리 스타일의 필터이다.
아가로스 또는 아크릴아마이드 겔로부터 DNA 제거에 이상적이다.
필터막은 CA(아세트산셀루로오스) 또는 NY(나일론)으로 되어있다. 이 막은 0.22 또는 0.45㎛ 크기의 구멍이다.
그런데 우리가 실험한 것의 크기가 1.1kb이므로 3.4㎚/10bp = ■㎚/1.1kb ■ = 374㎚ = 0.374㎛
그래서 아마 0.23㎛ 크기의 구멍을 사용해야 DNA 필터를 통과하지 못할 것이다.
2) GB & NW buffer
- 아가로스겔에서 DNA 용출 시 사용하는 Elution(DNA 회수)에서 주로 쓰게 되는 두 buffer.
- GB buffer는 gel을 녹일 때 사용 (노란색)
참고 자료
Dr. Bruce 외 7인, 필수세포생물학, Garland Science, 2010, pp.350-351
https://en.wikipedia.org/wiki/Gel_exraction
http://biotechcrunch.blogspot.kr/2011/11/9-factors-affecting-dna-extraction-from.html
http://blog.naver.com/withcoffee67/70160635571
https://ko.m.wikipedia.org/wiki/Taq_%EC%A4%91%ED%95%A9%ED%9A%A8%EC%86%8C
http://m.ibric.org/miniboard/read.php?Board=exp_qna&id=23037&ksr=1&FindText=reverse
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/cls8160?lang=ko®ion=KR
http://bioland-sci.com/index.php?main_page=product_info&products_id=429
https://en.m.wikipedia.org/wiki/Gel_extraction