PCR, 전기영동 - 화공환경과 생물화학공학 실험보고서

목차

1. 제목
2. 실험 목적
3. PCR 관련 이론
4. PCR 실험 준비 및 실험 방법
5. 전기영동 관련 이론
6. 전기영동 실험 준비 및 실험 방법
7. 결과 및 고찰
8. 참고 문헌

본문내용

PCR, 전기영동 실험 보고서

목적
:PCR를 통해서 DNA를 복제시키고 전기영동 실험을 통해서 복제한 DNA 절편크기(Size)를 확인한다.

PCR 관련 이론
PCR (polymerase chain reaction)은 중합 효소 연쇄반응 이라는 말로 DNA의 원하는 부분을 복제·증폭시키는 분자생물학적인 기술이다. 1983년에 캐리 멀리스가 특정 DNA 서열을 증폭하기 위한 방법을 고안하여 만들어진 실험 방법으로, 이 기술은 양이 매우 작은 DNA 용액에서 실험자가 원하는 특정 DNA 단편(절편)만을 선택적으로 증폭시킬 수 있다. 이 때 DNA를 증폭시킬 때 기하급수적으로 숫자가 늘어나는 것을 볼 수 있는데, 실험자가 PCR을 회 반복시킨다면 의 표적 DNA를 증폭시킬 수 있다.

PCR의 원리 : PCR은 변성-상보결합-신장 순서의 3가지 과정으로 진행된다.

변성(Denaturation)은 DNA의 변성을 말하는 것으로 95‘C 에서 dsDNA(double stranded DNA) 를 처리하면 이중나선구조의 수소결합이 끊어져서 ssDNA(single stranded DNA)로 분리된다. 즉, 이중 가닥 DNA를 단일 가닥 DNA로 분리시키는 과정이다.
3.2.2 상보결합(Annealing)은 사용된 프라이머(primers)와 분리된 주형 DNA 가닥의 결합을 의미한다. 40'C ~ 60'C의 온도에서 진행되며, 서로 다른 2개에 Primer에 의해서 각각 ssDNA의 3’ 말단에 수소결합을 하여 붙게 된다. 염기 간의 결합은 G와 C는 세 군데에서 수소결합이 일어나고, A와 T는 두 군데에서 결합이 일어나므로 G-C 결합이 A-T결합보다 강하다.

참고 자료

https://m.blog.naver.com/PostView.nhn?blogId=qwerty_0620&logNo=220780206971&proxyReferer=https%3A%2F%2Fwww.google.com%2F
http://www.dynebio.co.kr/product/view.htm?it_id=1401000000&ca_id=106020
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https://gozar-de-la-vida.tistory.com/395
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https://www.bioin.or.kr/board.do?num=1902&cmd=view&bid=tech